Anticuerpo policlonal anti-fosfo-Smad2 (Ser467) para WB, IHC-P, ELISA - Q15796

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de SMAD2

• SMAD2 (miembro 2 de la familia SMAD), también conocido como JV18-1, MADH2 o hMAD-2, es un SMAD regulado por receptores (R-SMAD) que funciona como un transductor de señal intracelular y modulador transcripcional aguas abajo de las quinasas del receptor de TGF-beta y activina tipo 1.
• Tras la unión del ligando, SMAD2 se fosforila y forma un complejo con SMAD4. Este complejo se transloca al núcleo, se une al elemento TRE en los promotores de genes diana y activa la transcripción, regulando así diversos procesos celulares.
• SMAD2 regula positivamente la actividad de la quinasa PDPK1 al promover su disociación de la proteína inhibidora 14-3-3 YWHAQ, influyendo así en las vías de señalización posteriores.
• Puede actuar como supresor de tumores en el carcinoma colorrectal, como sugieren los estudios funcionales. Referencias relacionadas: PMID:8752209
• SMAD2 promueve la transcripción mediada por TGFB1 de genes de diferenciación odontoblástica en células de la papila dental, destacando su papel en la diferenciación específica de tejido.
• La localización subcelular es principalmente citoplasmática en ausencia de señal, pero tras la fosforilación se transloca al núcleo. La proteína se desplaza entre el citoplasma y el núcleo de forma dependiente de la fosforilación.
• SMAD2 se expresa ampliamente, con niveles altos en el músculo esquelético, células endoteliales, corazón y placenta, lo cual es consistente con su papel en la señalización cardiovascular y del desarrollo.
• La proteína experimenta múltiples modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación (crítica para la activación), acetilación y ubiquitinación. También es una fosfoproteína que une zinc con un peso molecular de aproximadamente 52.3 kDa.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado fue un péptido fosforilado sintético alrededor de la Ser467 de SMAD2 humano. Para asegurar la detección de la forma fosforilada, considere el uso de inhibidores de fosfatasa durante la preparación de la muestra.
• Para Western blot (WB), el peso molecular predicho de SMAD2 es de ~52 kDa. Observe las bandas en este tamaño; bandas adicionales pueden representar isoformas o modificaciones postraduccionales.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), optimice las condiciones de recuperación de antígeno, ya que los anticuerpos específicos de fosforilación pueden ser sensibles a los métodos de fijación.
• Para ELISA, el anticuerpo puede emplearse para la detección específica de fosfo; el emparejamiento con un anticuerpo total de SMAD2 puede permitir la evaluación de la estequiometría de fosforilación.
• Valide la especificidad del anticuerpo en la especie y el sistema de muestra relevantes utilizando controles positivos y negativos apropiados (por ejemplo, lisados tratados con fosfatasa para WB).

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