Anticuerpo policlonal Anti-Fosfo-SMO (S611/S615/S616) para WB y ELISA - Q99835

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de SMO

• SMO es un receptor acoplado a proteína G (GPCR) que media la vía de señalización de hedgehog, esencial para el desarrollo embrionario y la diferenciación celular.
  Referencias relacionadas: PMID:19592253, PMID:27437577, PMID:28344083

• En ausencia de hedgehog, SMO se mantiene en un estado inactivo por las proteínas patched (PTCH1/PTCH2) que restringen el acceso al colesterol. La unión del ligando de hedgehog a patched alivia esta inhibición, permitiendo que SMO se translocado a la membrana del cilio primario donde el colesterol se une y activa a SMO. Esto desencadena el acoplamiento a proteínas G(i), inhibiendo la adenilato ciclasa y reduciendo los niveles intracelulares de AMPc.
  Referencias relacionadas: PMID:27437577, PMID:28344083, PMID:31168089, PMID:32929279

• Los niveles reducidos de AMPc alivian la supresión mediada por la proteína quinasa A (PKA), promoviendo la liberación y translocación nuclear de los factores de transcripción GLI (GLI1, GLI2, GLI3), que luego activan la expresión de genes diana.
  Referencias relacionadas: PMID:31168089

• SMO activo suprime aún más la actividad de PKA al unirse directamente y secuestrar su subunidad catalítica (PRKACA) en la membrana celular, evitando así la fosforilación y el procesamiento proteolítico de los factores de transcripción GLI.
  Referencias relacionadas: PMID:36202993, PMID:39138140

• SMO promueve la eliminación de GPR161, un inhibidor constitutivo de la vía, de los cilios primarios, facilitando aún más la transducción de la señal.

• SMO reside principalmente en la membrana plasmática y en la membrana del cilio primario, lo que coincide con su función en la transducción de señales en estos centros de señalización críticos.

• SMO sufre modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación, glicosilación y lipidación, que contribuyen a su regulación y localización en la membrana.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se generó frente a un péptido fosforilado sintético que abarca los residuos S611, S615 y S616; se espera que reconozca específicamente la forma fosforilada de SMO humano. Para su confirmación, considere realizar un tratamiento con fosfatasa o comparar con un anticuerpo anti-SMO no fosforilado en su ensayo.
• Las aplicaciones recomendadas son Western blotting (WB) y ELISA. Para WB, el peso molecular predicho es de 86 kDa; valide el anticuerpo usando líneas celulares humanas relevantes o tejidos que se sabe que expresan SMO activo.
• Dado que la fosforilación de SMO es dinámica y aumenta con la activación de la vía de hedgehog, la estimulación con sonic hedgehog (SHH) u otros agonistas puede mejorar la sensibilidad de detección en sus experimentos.
• Se informa reactividad cruzada para SMO humano; si usa muestras de otras especies, verifique previamente la homología de secuencia alrededor de los sitios de fosforilación.

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