Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Fosfo-STAT1 (S727) para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P42224

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de STAT1

• STAT1 (transductor de señal y activador de la transcripción 1) existe como dos isoformas generadas por splicing alternativo, STAT1-alfa (p91) y STAT1-beta (p84), que difieren en su dominio de transactivación C-terminal.
• Como mediador clave de la señalización de interferón (IFN), STAT1 se fosforila en tirosina en respuesta a IFN de tipo I, se heterodimeriza con STAT2 e IRF9 para formar el complejo ISGF3, e induce la expresión de genes antivirales a través de elementos ISRE. Referencias relacionadas: PMID:28753426, PMID:35568036
• Bajo la estimulación de IFN de tipo II (IFN-gamma), STAT1 se fosforila tanto en residuos de tirosina como de serina, se homodimeriza en GAF, y se une a secuencias GAS para activar genes diana. Referencias relacionadas: PMID:8156998, PMID:26479788
• La señalización de STAT1 también se desencadena por KITLG/SCF y puede participar en vías mediadas por FGFR. Referencias relacionadas: PMID:15526160, PMID:19088846
• En la inmunidad innata, la endocitosis de TLR4 tras la estimulación con LPS conduce a la fosforilación dependiente de IKBKB de STAT1 en Thr-749, impulsando la transcripción de ARID5A e IL12B. Referencias relacionadas: PMID:32209697
• STAT1 es principalmente citoplasmático pero sufre translocación nuclear tras la activación; su transporte subcelular está regulado por la fosforilación y otras modificaciones postraduccionales, incluyendo acetilación, metilación y ubiquitinación.
• La fosforilación de la serina 727 en el dominio de transactivación es esencial para la máxima actividad transcripcional, y el anticuerpo reconoce específicamente esta modificación, permitiendo diseccionar la dinámica de activación de STAT1.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético alrededor de Ser727 de STAT1 humano; asegúrese de que la preparación de la muestra incluya inhibidores de fosfatasas para preservar el epítopo fosforilado.
• Para Western blot, espere una banda cerca de 87 kDa; un control con un anticuerpo STAT1 no fosforilado puede ayudar a confirmar la especificidad fosfo-específica.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC), optimice la fijación y la permeabilización para equilibrar la accesibilidad del antígeno y la retención del epítopo fosforilado; la fijación con metanol puede ser beneficiosa.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), pruebe cuidadosamente las condiciones de recuperación de antígenos; considere el uso de controles específicos para fosfo, como el tratamiento con fosfatasa lambda.
• Al usar ELISA, un experimento de bloqueo con fosfopéptido puede validar la especificidad de la señal.
• Se lista la reactividad cruzada con STAT1 de ratón y rata; sin embargo, verifique el rendimiento en su sistema modelo específico debido a posibles diferencias dependientes de la especie en la secuencia o la dinámica de fosforilación.

CamelBio: Su Puente de Abastecimiento Integral

CamelBio apoya a los fabricantes de diagnóstico y a los investigadores con acceso integral a anticuerpos IVD validados, incluidos reactivos específicos para fosfo-STAT1 para estudios de señalización JAK/STAT. Nuestra plataforma de abastecimiento integral proporciona pares de anticuerpos, reactivos auxiliares a granel y soluciones de materias primas personalizadas para agilizar el desarrollo de sus ensayos desde el concepto hasta la clínica.