Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fosfo-Syk (Y525/526) para WB y ELISA - P43405

Especificaciones y Parámetros Centrales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de SYK

• SYK (quinasa de tirosina del bazo) es una quinasa de tirosina no receptora que media la transducción de señales aguas abajo de una variedad de receptores transmembrana, regulando la inmunidad innata y adaptativa, la adhesión celular, la maduración de osteoclastos, la activación plaquetaria y el desarrollo vascular. Referencias relacionadas: PMID:12387735 PMID:33782605
• Esencial para la señalización del receptor de células B (BCR), SYK es necesaria para la maduración de las células B en la transición de pro-B a pre-B. Referencias relacionadas: PMID:12456653
• Tras la activación del BCR, SYK fosforila adaptadores clave como BLNK y efectores como PLCG1, vinculando el receptor activado a la movilización de calcio y las vías de señalización de PKC.
• En el sistema inmunitario innato, SYK es activado por receptores lectina tipo C (por ejemplo, CLEC7A) tras la estimulación fúngica, desencadenando la producción de ROS, la activación del inflamasoma y la transcripción de citoquinas mediada por NF-κB.
• SYK es necesario para la fagocitosis de neutrófilos estimulada por IL-15, destacando su función en la actividad de las células mieloides. Referencias relacionadas: PMID:15123770
• Subcelularmente, SYK se localiza en la membrana celular, en el citoplasma y en el citosol, translocándose dinámicamente hacia los receptores activados.
• Se expresa ampliamente en células hematopoyéticas, con expresión prominente en linajes de células B (desde pro-B hasta células plasmáticas) y neutrófilos. Referencias relacionadas: PMID:8163536
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la autofosforilación en los residuos de tirosina 525 y 526 en el bucle de activación, así como la ubiquitinación, que regulan la actividad quinasa y la estabilidad de la proteína.

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• Dado que este anticuerpo reconoce específicamente la fosforilación en Tyr525 y Tyr526, asegúrese de que los lisados celulares se preparen con inhibidores de fosfatasas para preservar la fosforilación. Para Western blot, valide la señal tratando las muestras con fosfatasa lambda o comparando condiciones estimuladas frente a no estimuladas.
• Al realizar ELISA, considere utilizar un antígeno de recubrimiento de péptido fosforilado y un péptido control no fosforilado para confirmar la especificidad de la fosforilación.
• Las diluciones óptimas del anticuerpo para WB deben determinarse empíricamente; las diluciones iniciales típicas para anticuerpos policlonales oscilan entre 1:500 y 1:2000.
• No se espera reactividad cruzada con otras especies según el diseño del inmunógeno, pero no se ha verificado experimentalmente.

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