Anticuerpo policlonal de conejo Anti-Fosfo-TBK1/NAK-S172 para WB, IHC-P, ELISA - Q9UHD2

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de TBK1

• TBK1 es una serina/treonina proteína quinasa codificada por el gen TBK1, también conocido como NAK o T2K.
• Desempeña un papel esencial en la regulación de las respuestas inflamatorias a agentes extraños al fosforilar los factores reguladores de interferón (IRF) IRF3 e IRF7, lo que conduce a su dimerización y translocación nuclear para inducir genes antivirales como IFNA e IFNB (PubMed:10581243, PubMed:11839743, PubMed:12692549, PubMed:12702806, PubMed:14703513, PubMed:15367631, PubMed:25636800). Referencias relacionadas: PMID:10581243, PMID:11839743, PMID:12692549, PMID:12702806, PMID:14703513, PMID:15367631, PMID:25636800
• TBK1 también puede funcionar como efector de NF-kappa-B al fosforilar NFKBIA, IKBKB o RELA, promoviendo así la translocación nuclear de NF-kappa-B (PubMed:10783893, PubMed:15489227). Referencias relacionadas: PMID:10783893, PMID:15489227
• Actúa en la autofagia antibacteriana al fosforilar OPTN en Ser-177, mejorando la unión a LC3 (PubMed:21617041). Referencias relacionadas: PMID:21617041
• TBK1 regula positivamente mTORC1 al fosforilar MTOR, pero también limita mTORC1 mediante la fosforilación de RPTOR (PubMed:29150432, PubMed:31530866). Referencias relacionadas: PMID:29150432, PMID:31530866
• Su localización subcelular es predominantemente citoplasmática.
• Se expresa de forma ubicua con mayor expresión en el testículo; también se encuentra en células ganglionares, capa de fibras nerviosas y microvasculatura de la retina.
• Está asociado a enfermedades como la esclerosis lateral amiotrófica y el glaucoma; la fosforilación juega un papel fundamental en su actividad quinasa y su señalización.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético alrededor de la Ser172 de TBK1 humana. Para la validación de la especificidad por fosfato, considere el tratamiento de las muestras con fosfatasa o la preincubación con péptido competidor no fosforilado.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es de aproximadamente 84 kDa; asegure una separación y transferencia adecuadas, y utilice un marcador de peso molecular.
• La IHC-P puede requerir protocolos de recuperación de antígeno optimizados; pruebe tanto los métodos basados en citrato como en EDTA, y considere el uso de condiciones adecuadas para antígenos fosforilados.
• Este anticuerpo policlonal de conejo está validado para ELISA; realice una titulación adecuada para determinar la concentración de trabajo óptima.
• Se ha reportado reactividad cruzada con ratón y rata, pero la conservación de la secuencia sugiere que también puede reconocer otras especies; valídelo en su sistema modelo específico.
• Al igual que con todos los anticuerpos policlonales, puede producirse variabilidad entre lotes; considere validar cada lote nuevo en un experimento piloto.

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