Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Fosfo-TIFA-T9 para WB, ELISA - Q96CG3

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Proteína Interactiva con TRAF y Dominio FHA A

• La proteína interactiva con TRAF y dominio FHA A (TIFA), también conocida como T2BP, T6BP o TIFAA, está codificada por el gen TIFA (ID de gen: 92610) y pertenece a una familia de proteínas involucradas en la señalización inmune innata.
• Molécula adaptadora que desempeña un papel clave en la activación de la señalización proinflamatoria NF-kappa-B tras la detección de metabolitos de patrones moleculares asociados a patógenos bacterianos (PAMPs). Referencias relacionadas: PMID:12566447, PMID:15492226, PMID:26068852
• Promueve la activación de una respuesta inmune innata induciendo la oligomerización y poliubiquitinación de TRAF6, lo que conduce a la activación de TAK1 e IKK a través de un mecanismo independiente del proteasoma. Referencias relacionadas: PMID:12566447, PMID:15492226, PMID:26068852
• La respuesta inmune innata dependiente de TIFA se desencadena por ADP-D-glicero-beta-D-mano-heptosa (ADP-Heptosa), un PAMP potente presente en todas las bacterias gramnegativas y algunas grampositivas: la ADP-Heptosa es reconocida por ALPK1, que fosforila TIFA en Thr-9, lo que lleva a la homooligomerización de TIFA y la posterior activación de la señalización proinflamatoria NF-kappa-B. Referencias relacionadas: PMID:30111836
• Se localiza predominantemente en el citoplasma, donde puede interactuar con quinasas aguas arriba y efectores aguas abajo como TRAF6.
• La fosforilación postraduccional en Thr-9 es un evento regulatorio crítico, que convierte a TIFA en una plataforma de señalización activa; pueden existir sitios de fosforilación adicionales como lo indica su clasificación como fosfoproteína.
• La proteína tiene un peso molecular de aproximadamente 21,4 kDa (calculado a partir de la secuencia) y forma parte de una red que vincula la detección de patógenos con las respuestas inflamatorias.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético alrededor de Thr-9 de la TIFA humana, lo que sugiere que el anticuerpo está diseñado para reconocer específicamente la forma fosforilada en Thr-9 de TIFA. Confirme la especificidad utilizando controles desfosforilados o inhibidores relevantes.
• Para la transferencia Western (Western blotting), el tamaño de banda predicho es de ~21 kDa; considere optimizar las condiciones de bloqueo y detección para minimizar la unión inespecífica.
• En ELISA, asegúrese de que el péptido o antígeno proteico se recubra adecuadamente y que el estado de fosforilación se preserve durante la preparación de la muestra.
• Dado que la reactividad cruzada se indica solo para humano, valide el anticuerpo en las líneas celulares humanas o muestras de tejido apropiadas donde se induzca la fosforilación de TIFA (por ejemplo, tras la activación de ALPK1 por ADP-Heptosa).
• Este anticuerpo es adecuado para aplicaciones como WB y ELISA; para otros formatos de ensayo, se recomiendan experimentos piloto para verificar el rendimiento.

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