Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fosfo-β-Catenina-S45 para WB, ELISA - P35222

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la β-Catenina

• La β-catenina (catenina beta-1) es un efector clave aguas abajo de la vía de señalización Wnt canónica. En ausencia de Wnt, forma un complejo de destrucción con AXIN1/2, APC, CSNK1A1 y GSK3B que fosforila sus residuos N-terminales Ser/Tre, lo que conduce a la ubiquitinación por BTRC y la degradación proteosomal. En presencia de ligandos Wnt, la β-catenina escapa de la degradación, se acumula en el núcleo y actúa como un coactivador para los factores de transcripción TCF/LEF para activar los genes diana de Wnt.
  Referencias relacionadas: PMID:17524503 PMID:18077326 PMID:18086858
• Más allá de la señalización Wnt, la β-catenina también funciona como un coactivador transcripcional para otros factores, como NR5A2, y promueve la transición epitelial-mesenquimal (EMT) al impulsar los genes diana de CTNNB1/TCF.
  Referencias relacionadas: PMID:22187462 PMID:29910125
• Como componente del complejo de adhesión E-cadherina:catenina, la β-catenina media la adhesión célula-célula en las uniones adherentes, vinculando las cadherinas al citoesqueleto de actina.
• La β-catenina se localiza en múltiples compartimentos subcelulares, incluidos el citoplasma, el núcleo, las uniones adherentes, la membrana celular, el centrosoma, el polo del huso y la sinapsis, lo que refleja sus diversos roles en señalización, adhesión y polaridad.
• Las modificaciones postraduccionales regulan su estabilidad y actividad: fosforilada en residuos N-terminales Ser/Tre para degradación, acetilada, S-nitrosilada y ubiquitinada; también está sujeta a regulación mediada por sumoilación. Las palabras clave de UniProt incluyen fosfoproteína, glicoproteína y conjugación Ubl.
• El análisis de expresión tisular muestra β-catenina en tipos de células del folículo piloso (matriz basal y periférica, vaina radicular interna/externa), colon, neuronas corticales y tejidos de cáncer de mama.
  Referencias relacionadas: PMID:29367600
• El gen CTNNB1 se asocia con diversas enfermedades, incluido el cáncer (por reordenamientos o mutaciones estabilizadoras), discapacidad intelectual y otros trastornos del desarrollo.

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se generó contra un péptido fosforilado sintético alrededor de Ser45 de la β-catenina humana; se espera que reconozca específicamente la β-catenina fosforilada en Ser45, pero no la proteína no modificada. Para la detección endógena, incluya inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra.
• Según los datos del proveedor, el anticuerpo es adecuado para aplicaciones de Western blot (WB) y ELISA. Para WB, valide la banda prevista alrededor de 85 kDa en lisados de control positivo (por ejemplo, células estimuladas con Wnt o inhibidas con GSK3).
• El anticuerpo muestra reactividad cruzada con la β-catenina de ratón y rata, lo que lo hace útil en los organismos modelo comunes. Siempre confirme la especificidad en su sistema utilizando muestras tratadas con fosfatasa o péptidos bloqueadores específicos.
• Dado que el estado de fosforilación de la β-catenina cambia rápidamente con el tratamiento celular, el tiempo experimental cuidadoso y el manejo de las células son críticos; considere usar un protocolo de estabilización de β-catenina si también es necesario comparar los niveles totales.
• Este producto se envía en hielo para preservar su actividad; almacene las alíquotas a las temperaturas recomendadas y evite los ciclos de congelación-descongelación.
• Para ELISA, optimice las concentraciones de recubrimiento y las condiciones de detección utilizando controles estándar de péptido fosfo versus péptido no fosfo para garantizar la especificidad del sitio fosfo.

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