Anticuerpo Policlonal Anti-Fosfo-VASP-S239 para WB, IHC-P, ELISA - P50552

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de VASP

• VASP (fosfoproteína estimulada por vasodilatadores) es una proteína asociada a actina perteneciente a la familia Ena/VASP, que cumple funciones cruciales en la dinámica del citoesqueleto de actina y la polaridad celular.
• VASP promueve la elongación de los filamentos de actina al proteger los extremos puntiagudos de las proteínas de taponamiento y aumentar las tasas de polimerización, regulando así la dinámica de lamellipodios y filopodios, la activación plaquetaria y la migración celular.
• En las plaquetas, donde se expresa de forma abundante, VASP regula la dinámica de la actina y desempeña un papel importante en la agregación plaquetaria.
• VASP se localiza en adhesiones focales, uniones estrechas y la membrana de lamellipodios y filopodios, funcionando en sitios de remodelación dinámica de la actina.
• VASP es una fosfoproteína; la fosforilación en sitios reguladores modula sus funciones en el ensamblaje de actina, siendo S239 un objetivo clave para la señalización por quinasas.
• La proteína contiene dominios enrollados y de unión a SH3 que median interacciones proteicas esenciales para la organización citoesquelética y la motilidad celular.
• VASP también contribuye a la motilidad basada en actina de patógenos como Listeria monocytogenes en las células huésped.

Guía experimental y consejos técnicos

• Debido a que el inmunógeno es un fosfopéptido sintético, incluya inhibidores de fosfatasas durante la preparación de muestras para preservar las marcas de fosforilación y obtener una detección precisa.
• Valide la fosfoespecificidad en Western blot tratando las muestras con lambda fosfatasa; la pérdida de señal confirma la dependencia de la fosforilación de S239.
• Para IHC-P, optimice suavemente las condiciones de recuperación de antígeno, ya que el calor excesivo puede alterar el grupo fosfato; considere utilizar un método de recuperación a baja temperatura.
• Verifique la homología de secuencia de la región peptídica en ratón y rata para confirmar la reactividad cruzada esperada; pequeños desajustes pueden afectar la afinidad de unión.
• Siempre ejecute controles fosforilados y no fosforilados en paralelo para distinguir la proteína total de las señales fosforiladas.

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