Anticuerpo policlonal de conejo anti-Vimentina fosforilada S83 para WB, ELISA - P08670

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la vimentina

• La vimentina es una proteína de filamento intermedio de clase III de 54 kDa codificada por el gen VIM (ID de gen: 7431) y es miembro de la familia de los filamentos intermedios. También se conoce alternativamente como CTRCT30 o HEL113.
• Forma redes citoesqueléticas predominantemente en células mesenquimales y cumple un papel fundamental en el mantenimiento de la forma celular, la integridad y el soporte mecánico.
• La vimentina participa en la migración celular, el movimiento direccional, la organización de láminas celulares y la polarización del complejo de Golgi en el frente de migración, y puede promover el crecimiento de axones y la reparación de fibras motoras mediante el reclutamiento mediado por DSP.
• Interactúa con LARP6 para estabilizar los ARNm de colágeno de tipo I (COL1A1 y COL1A2), lo que pone de relieve su papel en la regulación de la matriz extracelular.
• Subcelularmente, la vimentina se localiza en el citoplasma, el citoesqueleto, la matriz nuclear, la membrana celular y las proyecciones celulares como los axones, y se asocia con orgánulos como el núcleo, el retículo endoplásmico y las mitocondrias.
• Se expresa en gran medida en fibroblastos, con cierta expresión en linfocitos T y B, y a menudo se sobreexpresa en líneas celulares de carcinoma mamario independiente de hormonas, por lo que actúa como marcador de la transición epitelial-mesenquimal (EMT).
• La vimentina sufre diversas modificaciones postraduccionales, que incluyen la fosforilación en Ser83 (el sitio diana de este producto), acetilación, glicación, S-nitrosilación y conjugación con ubiquitina, que regulan el ensamblaje y desensamblaje de los filamentos.
• Está implicada en enfermedades como la catarata y se sabe que interactúa con proteínas virales (interacción huésped-virus), lo que refleja su amplia relevancia funcional.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético alrededor de la Ser83 de la vimentina humana. Al usar este anticuerpo policlonal para Western blotting, tenga en cuenta que la fosforilación en Ser83 puede verse influida por vías de señalización celular como aquellas que involucran a la proteína quinasa C o los factores de crecimiento.
• Para aplicaciones de ELISA, asegúrese de que el antígeno presente el epítopo fosforilado en una conformación compatible con el reconocimiento policlonal y valide la detección en su matriz de muestra específica.
• La vimentina se expresa en gran medida en células mesenquimales y ciertas líneas celulares cancerosas; por lo tanto, controles positivos como fibroblastos o líneas celulares de carcinoma mamario independiente de hormonas (por ejemplo, MDA-MB-231) pueden ser adecuados para los experimentos iniciales.
• La reactividad cruzada con rata se predice basada en la homología de secuencia; es recomendable confirmar la reactividad en tejidos o líneas celulares de rata en sus condiciones experimentales.
• El peso molecular predicho de la vimentina es de ~54 kDa, pero la fosforilación y otras modificaciones pueden causar ligeros desplazamientos; verifique el patrón de bandas usando marcadores de peso molecular adecuados y controles tratados con fosfatasa.

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