Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fosfo-YAP1-S127 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P46937

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de YAP1

• El regulador transcripcional YAP1 (proteína 1 asociada a Yes, homólogo de Yorkie) es un componente central de la vía de señalización Hippo, donde actúa como coactivador y correpresor para controlar el tamaño de los órganos y suprimir la tumorigénesis. Referencias relacionadas: PMID:17974916 PMID:18280240
• La fosforilación mediada por LATS1/2 en Ser127 promueve la retención citoplasmática de YAP1 al generar un sitio de unión para 14-3-3, inhibiendo así su translocación nuclear y actividad transcripcional. Referencias relacionadas: PMID:18158288 PMID:26598551 PMID:34404733
• YAP1 nuclear se une a los factores de transcripción TEAD para regular genes involucrados en la proliferación celular, el crecimiento independiente de anclaje y la transición epitelial-mesenquimal (EMT). Referencias relacionadas: PMID:18579750
• YAP1 regula la morfología tisular 3D y la contractilidad de actomiosina a través de ARHGAP18, y actúa como correpresor para suprimir la ciliogénesis al regular a la baja la expresión de AURKA y PLK1. Referencias relacionadas: PMID:25778702 PMID:25849865
• YAP1 coopera con WWTR1/TAZ para modular la señalización TGF-β/SMAD y sinergiza con WBP2 para mejorar la actividad transcripcional del receptor de progesterona. Referencias relacionadas: PMID:16772533
• YAP1 se localiza predominantemente en el citoplasma y se transloca al núcleo tras la activación; también se encuentra en uniones estrechas y en la membrana celular.
• El aumento de la expresión de YAP1 se asocia con cánceres de hígado y próstata, mientras que las isoformas truncadas en el extremo N se detectan en neuronas estriatales de la enfermedad de Huntington.
• YAP1 se clasifica como una fosfoproteína y proto-oncogén, lo que refleja su regulación dependiente de fosforilación y su potencial oncogénico.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para la detección fosfo-específica, incluya siempre cócteles de inhibidores de fosfatasas durante la lisis celular y la preparación de muestras para preservar el estado de fosforilación de Ser127.
• Verifique la fosfo-especificidad tratando las muestras con fosfatasa lambda o fosfatasa intestinal de ternera antes de la inmunodetección (immunoblotting).
• Para IHC-P, optimice los métodos de recuperación de antígeno (p. ej., tampón citrato pH 6.0 o EDTA pH 9.0) para equilibrar la exposición del fosfo-epítopo y la morfología tisular.
• Para IF/ICC, permeabilice las células con Tritón X-100 al 0,1–0,5% y utilice un tampón de bloqueo compatible con la detección de anticuerpos fosfo (p. ej., BSA al 5% en TBST).
• Al realizar ELISA, considere usar un péptido no fosforilado como control negativo para validar la especificidad.
• Dado que se trata de un anticuerpo policlonal de conejo, utilice un anticuerpo secundario anti-conejo apropiado y confirme las diluciones óptimas empíricamente para cada aplicación.

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