Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Phospho-ZAP70-Y319 para WB, IP, ELISA - P43403

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ZAP70

• ZAP-70 (proteína asociada a la cadena zeta de 70 kDa) es una tirosina quinasa citoplasmática codificada por el gen ZAP70 (SRK) y pertenece a la familia Syk de tirosina quinasas no receptoras.
• Esencial para la inmunidad adaptativa, ZAP-70 es reclutada al complejo del receptor de células T (TCR) fosforilado en la membrana plasmática a través de sus dominios SH2, iniciando la señalización descendente. Referencias relacionadas: PMID:7509083
• Tras la activación del TCR, ZAP-70 fosforila adaptadores clave como LAT y LCP2, desencadenando cascadas que conducen a la activación, proliferación y producción de citoquinas de las células T.
• Regula el desarrollo de los timocitos, promoviendo la supervivencia y la progresión del ciclo celular de los timocitos doble negativos antes de la selección positiva.
• También está involucrada en el desarrollo y activación primaria de las células B a través de la señalización del receptor de células B (BCR).
• Localizada en el citoplasma y en la membrana celular, ZAP-70 sufre fosforilación en Y319 (entre otros residuos) para aliviar la autoinhibición y permitir la actividad quinasa completa.
• La fosforilación, acetilación y ubiquitinación son modificaciones postraduccionales críticas que regulan la estabilidad y función de ZAP-70.
• Se expresa predominantemente en células T, células asesinas naturales (NK), timocitos tempranos y células pro/pre-B.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se generó contra un péptido fosforilado sintético correspondiente a Y319 de ZAP70 humano; confirme la especificidad mediante un ensayo de competición con péptido si es necesario.
• Para Western blot, utilice protocolos fosfo-específicos validados e incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis para preservar los estados de fosforilación.
• En experimentos de inmunoprecipitación, se recomiendan condiciones de lisis suaves para mantener las interacciones proteína-proteína y la accesibilidad del epítopo.
• Valide el rendimiento en líneas celulares T humanas apropiadas (como Jurkat) activadas mediante anti-CD3/CD28 para inducir la fosforilación de ZAP70.
• Para aplicaciones de ELISA, titule la concentración de anticuerpo contra un estándar de fosfo-péptido para asegurar un rango de detección lineal.

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