Anticuerpo monoclonal de conejo anti-PI3 Kinasa p110 alfa para WB, IP, ELISA - P42336

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de la PI3 Kinasa p110 alfa

• La PI3 Kinasa p110 alfa, codificada por el gen PIK3CA, es la subunidad catalítica de 110 kDa del complejo de fosfoinosítido 3-quinasa (PI3K) de clase I, también conocida como p110alfa.
• Cataliza la fosforilación del fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato (PIP2) para generar fosfatidilinositol 3,4,5-trisfosfato (PIP3), un segundo mensajero crítico en numerosas vías de señalización. Referencias relacionadas: PMID:15135396, PMID:28676499
• El PIP3 recluta proteínas que contienen dominios de homología de pleckstrina (PH), como AKT1 y PDPK1, a la membrana plasmática, desencadenando cascadas descendentes que regulan el crecimiento, la supervivencia, la proliferación y la motilidad celular.
• La enzima es activada por receptores tirosina quinasa (RTK) en respuesta a factores de crecimiento como EGF, insulina, IGF1, VEGFA y PDGF, desempeñando un papel clave en la señalización de la insulina y la angiogénesis.
• Más allá de su actividad de lípido quinasa, la PI3K p110 alfa también exhibe actividad de serina-proteína quinasa, autofosforilando la subunidad reguladora p85 y fosforilando sustratos como 4EBP1 y H-Ras. Referencias relacionadas: PMID:23936502, PMID:28676499
• La proteína es esencial para el desarrollo vascular y la migración de células endoteliales, particularmente a través de la señalización de VEGFA y la regulación de la actividad de RhoA; también participa en la fagocitosis y pinocitosis.
• Las palabras clave indican que es un protooncogén con variantes de enfermedad, y las mutaciones somáticas en PIK3CA se observan frecuentemente en cánceres humanos, lo que lo convierte en un biomarcador y objetivo terapéutico clave.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blot (WB), espere una banda específica de aproximadamente 124 kDa en lisados celulares o de tejido humano, de ratón y de rata. Valide la carga de proteína y la eficiencia de transferencia.
• En inmunoprecipitación (IP), valide el enriquecimiento de p110 alfa y las proteínas co-inmunoprecipitadas en condiciones nativas, considerando la reactividad del anticuerpo con la región del inmunógeno (aa 294–610).
• Para ELISA, optimice las condiciones de recubrimiento y las concentraciones de anticuerpo utilizando p110 alfa recombinante o extractos celulares; la reactividad cruzada con especies de roedores permite flexibilidad en los sistemas modelo.
• Dado el papel del objetivo en la vía PI3K/AKT, considere usar este anticuerpo en ensayos que estudien la proliferación celular, la supervivencia o el análisis de biomarcadores de cáncer.
• Incluya siempre controles positivos y negativos adecuados para confirmar la especificidad, especialmente cuando trabaje con muestras que puedan contener otras isoformas de PI3K.

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