Anticuerpo monoclonal de conejo anti-PI3 Quinasa p85 alfa para WB, IF, IHC, ELISA - P27986

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la PI3 Quinasa p85 alfa

• El gen PIK3R1 codifica la subunidad reguladora p85-alfa de la fosfoinosítido 3-quinasa (PI3K), que forma un heterodímero con una subunidad catalítica p110; el empalme alternativo produce múltiples isoformas (p. ej., la isoforma 2 se expresa en músculo esquelético y cerebro).
• La p85 alfa actúa como un adaptador que se une, a través de sus dominios SH2, a residuos de tirosina fosforilados en receptores tirosina quinasa activados (p. ej., FGFR, KIT, PDGFR) y proteínas adaptadoras, reclutando la subunidad catalítica p110 a la membrana plasmática para la producción localizada de PIP3. Referencias relacionadas: PMID:7518429
• En tejidos sensibles a la insulina, la p85-alfa es necesaria para la captación de glucosa estimulada por insulina y la síntesis de glucógeno, desempeñando un papel crítico en la regulación metabólica.
• La proteína media la señalización aguas abajo de múltiples receptores de factores de crecimiento, incluidos FGFR1–4, KIT, PDGFRA/B e integrina ITGB2, influyendo en el crecimiento, supervivencia y migración celular. Referencias relacionadas: PMID:17626883, PMID:19805105, PMID:7518429
• La localización subcelular es predominantemente citoplasmática, con translocación dependiente de estímulo a la membrana plasmática.
• La proteína sufre modificaciones postraduccionales extensas (fosforilación, acetilación y ubiquitinación) que ajustan finamente su actividad y estabilidad.
• Durante el estrés del retículo endoplásmico (RE), la p85-alfa promueve la translocación nuclear de la isoforma 2 de XBP1 de manera dependiente de insulina o estrés del RE, contribuyendo a una mejor tolerancia a la glucosa bajo sobrecarga metabólica. Referencias relacionadas: PMID:20348923
• La isoforma 2 está enriquecida en músculo esquelético y cerebro, con niveles más bajos en riñón y músculo cardíaco; tanto la isoforma 2 como la isoforma 4 se detectan a nivel de proteína en músculo esquelético.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre los aminoácidos 240–380, una región que contiene el dominio inter-SH2 (iSH2) que media la unión a las subunidades catalíticas p110; el anticuerpo puede reconocer epítopos conservados entre las isoformas de p85.
• Para Western blot, el peso molecular predicho de p85-alfa es ~84 kDa; valide con controles positivos como lisados de HepG2 o 3T3-L1 estimulados con insulina, e incluya muestras humanas, de ratón o de rata según corresponda.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), las condiciones de recuperación de antígeno deben optimizarse; el anticuerpo es adecuado tanto para tejidos congelados (IF-P) como incluidos en parafina.
• En inmunofluorescencia/ICC, espere una tinción citoplasmática con posible enriquecimiento en membrana tras estimulación con factor de crecimiento.
• Las aplicaciones de ELISA pueden beneficiarse de un par de anticuerpos emparejados; la reactividad cruzada entre humano, ratón y rata amplía su utilidad en modelos traslacionales.

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