Anticuerpo monoclonal de conejo anti-PI3 cinasa p85 alfa/beta para WB, ELISA - P27986 / O00459

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de PI3 cinasa p85 alfa/beta

• Codificadas por PIK3R1 (p85-alfa) y PIK3R2 (p85-beta), estas subunidades reguladoras de la fosfatidilinositol 3-cinasa actúan como proteínas adaptadoras que conectan la subunidad catalítica p110 con las tirosina cinasas receptoras activadas mediante dominios SH2.
• Se une a las tirosina cinasas proteicas activadas mediante su dominio SH2, mediando la translocación a la membrana de la unidad catalítica p110. Es esencial para la captación de glucosa y la síntesis de glucógeno estimuladas por la insulina en tejidos sensibles a la insulina, y participa en las vías de señalización posteriores a FGFR, KIT y PDGFR. Modula las respuestas al estrés del retículo endoplásmico al promover la translocación nuclear de XBP1 en el hígado, contribuyendo a una mejor tolerancia a la glucosa. Referencias relacionadas: PMID:17626883 PMID:19805105 PMID:7518429 PMID:20348923
• El corte y empalme alternativo genera múltiples isoformas; la isoforma 2 se expresa predominantemente en el músculo esquelético y el cerebro, con niveles inferiores en el riñón y el músculo cardíaco.
• La localización subcelular es principalmente citoplasmática, donde facilita la transducción de señales desde los receptores de membrana hasta los efectores intracelulares.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, fosforilación y ubiquitinación, que influyen en su estabilidad y actividad. Palabras clave como dominio SH2, dominio SH3, interacción hospedador-virus y variante asociada a enfermedad (enanismo) destacan sus funciones multifuncionales.
• Actúa como factor del hospedador en las interacciones virales y está relacionado con trastornos del desarrollo como el síndrome SHORT (enanismo).

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido situado entre los aminoácidos 400 y 500 de p85 alfa/beta humana, una región conservada en ambas isoformas, lo que permite reconocer las variantes alfa y beta.
• Para Western blot (WB), valide el anticuerpo en lisados de líneas celulares humanas o de ratón que expresen PI3K p85 (por ejemplo, adipocitos HeLa, 3T3-L1). Bandas esperadas: ~42–54 kDa (predominantemente p85-alfa) y ~81–84 kDa (p85-beta). Pueden aparecer bandas adicionales procedentes de isoformas generadas por corte y empalme o productos de degradación; optimice la preparación de los lisados y la carga de las muestras según corresponda.
• Para ELISA, considere combinarlo con un anticuerpo de captura/detección validado después de realizar pruebas internas. Compruebe la reactividad cruzada con isoformas relacionadas y utilice condiciones adecuadas de bloqueo y lavado para minimizar el fondo.
• Dado que la reactividad cruzada está indicada para humanos y ratones, debe verificarse la conservación de la secuencia diana si se amplía el uso a otras especies; realice una alineación de secuencias antes de la aplicación.

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