Anticuerpo Policlonal Anti-PI3K p85α/p55γ/p85β para WB, IF/ICC, ELISA - P27986 / O00459 / Q92569

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PI3K p85α/p55γ/p85β (PIK3R1/PIK3R2/PIK3R3)

• Las subunidades reguladoras de PI3K p85α (PIK3R1), p55γ (PIK3R3) y p85β (PIK3R2) son adaptadores no catalíticos que conectan la subunidad catalítica p110 a los receptores tirosina quinasa activados. p85α contiene dos dominios SH2 y un dominio SH3, que se une a residuos de tirosina fosforilados en receptores como FGFR, KIT, PDGFR y la integrina β2 (ITGB2), mediando así el reclutamiento de PI3K a la membrana y su activación. Referencias relacionadas: PMID:17626883 PMID:19805105 PMID:7518429
• La subunidad p85α cumple un papel esencial en la señalización por insulina, promoviendo la captación de glucosa y la síntesis de glucógeno en tejidos sensibles a la insulina, y modula la respuesta celular al estrés del RE facilitando la translocación nuclear de la isoforma 2 de XBP1 durante la sobrecarga metabólica en el hígado. Referencias relacionadas: PMID:20348923
• Estas subunidades reguladoras existen en múltiples isoformas: PIK3R1 produce las isoformas p85α, p55α y p50α mediante empalme alternativo, mientras que PIK3R2 codifica p85β y PIK3R3 codifica p55γ. La isoforma 2 (p50α) de PIK3R1 se expresa principalmente en el músculo esquelético y el cerebro, con niveles más bajos en el riñón y el músculo cardíaco.
• Subcelularmente, la proteína p85α se localiza principalmente en el citoplasma, donde interactúa tanto con los complejos de receptores como con la subunidad catalítica p110.
• Modificaciones postraduccionales, como la acetilación, fosforilación y ubiquitinación, regulan la estabilidad y la señalización de p85α; la proteína también es un factor huésped conocido para interacciones virales (PALABRAS CLAVE: Acetilación, Fosfoproteína, Conjugación Ubl, Interacción huésped-virus).
• Los pesos moleculares predichos reflejan la diversidad de isoformas: p85α y p85β migran aproximadamente entre 81–84 kDa, mientras que las isoformas más cortas p55γ y p50α se detectan alrededor de 42–54 kDa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno se diseñó utilizando una secuencia peptídica conservada entre los aminoácidos 400–500, compartida por PIK3R1, PIK3R2 y PIK3R3, lo que permite reconocer múltiples isoformas de subunidades reguladoras y la reactividad cruzada con muestras de humano, ratón y rata.
• Para Western blotting (WB), valide la dilución del anticuerpo primario en su sistema de muestra específico; un rango inicial de 1:500–1:2000 se usa frecuentemente para anticuerpos policlonales de conejo, pero la optimización es fundamental para resolver las bandas esperadas de ~42–54 kDa (p55γ/p50α) y ~81–84 kDa (p85α/p85β).
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), incluya controles adecuados (por ejemplo, IgG de conejo no inmunizado) y considere protocolos de permeabilización que preserven los epítopos citoplasmáticos.
• Para ELISA, el anticuerpo puede usarse como reactivo de captura o detección; combínelo con un anticuerpo adecuado contra la subunidad catalítica p110 para configurar formatos sándwich para estudiar la dinámica de interacción de PI3K.

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