Anticuerpo policlonal de conejo anti-PI4KA para WB, IF/ICC, ELISA - P42356

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de PI4KA

• PI4KA (fosfatidilinositol 4-cinasa alfa), también conocida como PIK4CA o PI4K-ALPHA, es una cinasa lipídica que cataliza la fosforilación del fosfatidilinositol a fosfatidilinositol 4-fosfato, el primer paso comprometido en la generación del segundo mensajero inositol-1,4,5-trifosfato.
• Esta enzima desempeña un papel central en las vías de señalización de los fosfoinosítidos, regulando el tráfico de membrana, la proliferación celular y la homeostasis del calcio intracelular.
• Existen múltiples isoformas debido al corte y empalme alternativo; la isoforma canónica es una proteína grande con un peso molecular aproximado de 237 kDa.
• PI4KA se localiza principalmente en el citoplasma y la membrana celular, donde se asocia con la membrana plasmática para ejercer su actividad cinasa.
• La expresión tisular es ubicua, con niveles más altos en la placenta y el cerebro; la expresión es baja o está ausente en el pulmón, el hígado, el páncreas, los testículos y los leucocitos.
• La proteína contiene un dominio de unión al ATP y un dominio de cinasa lipídica, y su actividad está regulada por fosforilación.
• Las mutaciones en PI4KA están asociadas con la paraplejia espástica hereditaria (SPG84) y otros trastornos neurológicos, lo que destaca su importancia en la función neuronal.
• Las palabras clave de UniProt incluyen corte y empalme alternativo, unión al ATP, variante asociada a enfermedad, paraplejia espástica hereditaria, cinasa, metabolismo lipídico, membrana, neurodegeneración y fosfoproteína.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región C-terminal (aa 1780-1860); el anticuerpo puede reconocer epítopos en este segmento, lo que garantiza la detección de PI4KA de longitud completa.
• Debido al gran tamaño de la proteína (237 kDa), utilice un gel de SDS-PAGE de bajo porcentaje (por ejemplo, 6-8 %) y tiempos de transferencia prolongados para el Western blot.
• Para inmunofluorescencia/ICC, optimice las condiciones de fijación y permeabilización; pueden utilizarse Triton X-100 o digitonina para detectar PI4KA asociada a la membrana.
• Valide la especificidad del anticuerpo en líneas celulares relevantes (por ejemplo, HeLa, SH-SY5Y) o tejidos que expresen PI4KA, e incluya un control negativo, como lisados de pulmón o hígado, donde la expresión es baja.
• Para ELISA, considere utilizar un fragmento recombinante de PI4KA como estándar para establecer la sensibilidad y el intervalo lineal del ensayo.

CamelBio: su puente integral de abastecimiento

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