Anticuerpo policlonal de conejo anti-PICK1 para IHC-P, ELISA - Q9NRD5

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de PICK1

• PICK1 (proteína de unión a PRKCA), también denominada proteína 1 interactuante con la cinasa C o PRKCABP, actúa como una proteína adaptadora que se une a diversas proteínas de membrana y organiza su localización subcelular mediante interacciones con dominios PDZ.
• Desempeña un papel fundamental en la plasticidad sináptica al regular el tráfico y la internalización de los receptores de glutamato de tipo AMPA, posiblemente mediante mecanismos dependientes de PRKCA.
• PICK1 inhibe competitivamente la actividad nucleadora de actina del complejo Arp2/3 frente a los factores promotores de la nucleación, modulando así la morfología neuronal y la endocitosis de AMPAR.
• Es necesaria para el estrechamiento de las espinas durante la depresión a largo plazo (LTD) en las sinapsis excitadoras, vinculando la dinámica de la actina con el debilitamiento sináptico.
• PICK1 se localiza en el citoplasma, la región perinuclear, la membrana, la densidad postsináptica, la sinapsis y el sinaptosoma, y se asocia con el citoesqueleto.
• Se expresa de forma ubicua y también regula la morfología de los astrocitos al antagonizar al activador de Arp2/3 WASL/N-WASP.
• Entre otras funciones descritas se incluye la regulación de los canales iónicos sensibles a ácidos ASIC1/ASIC3.
• La proteína contiene sitios de unión a metales (zinc y calcio) y de modificación lipídica (palmitoilación), y está sujeta a fosforilación.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 300–400 de PICK1 humana (cerca del extremo C-terminal). El mapeo de epítopos sugiere que el anticuerpo puede reconocer un epítopo lineal dentro de esta región; considere utilizar el péptido para la inhibición competitiva en ELISA con el fin de confirmar la especificidad.
• Para IHC-P, se recomiendan métodos clásicos de recuperación antigénica (inducida por calor o enzimática), y los patrones de tinción deben reflejar localizaciones subcelulares conocidas, como el citoplasma y las densidades postsinápticas. Valide el anticuerpo en cerebro humano normal u otros tejidos que expresen PICK1.
• Al ser un anticuerpo policlonal, puede producirse variabilidad entre lotes; se recomienda realizar experimentos piloto e incluir controles positivos y negativos.
• Aunque originalmente no se validó para Western blot, si se intenta realizar WB después de la desnaturalización térmica, puede observarse la detección de una banda diana de aproximadamente 47 kDa; es esencial optimizar el bloqueo y la concentración del anticuerpo.

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