Anticuerpo policlonal de conejo anti-PIF4 para WB y ELISA - Q8W2F3

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización del factor de transcripción PIF4

• El factor de transcripción PIF4, también conocido como AtPIF4, bHLH9, EN102 y SRL2, es una proteína hélice-bucle-hélice básica codificada por el gen PIF4 en Arabidopsis thaliana. Integra las señales lumínicas y térmicas para regular el crecimiento.
• Actúa negativamente en la señalización del fitocromo B, controlando la expresión de genes implicados en la expansión celular mediante su unión a motivos G-box (por similitud).
• Es activado por los criptocromos CRY1 y CRY2 bajo niveles bajos de luz azul, uniéndose directamente a variantes del E-box (5'-CA[CT]GTG-3') en la cromatina para estimular la expresión génica de respuestas adaptativas como la elongación del hipocótilo. Referencias relacionadas: PMID:26724867
• Coopera con el coactivador transcripcional PTAC12/HMR/PAP5 y la subunidad MED14 del mediador para regular genes de crecimiento sensibles a la temperatura, principalmente los implicados en la biosíntesis y señalización de auxinas, promoviendo la termomorfogénesis, como la elongación del hipocótilo a temperaturas cálidas. Referencias relacionadas: PMID:30635559 PMID:33824329 PMID:36063057
• Se localiza exclusivamente en el núcleo, en consonancia con su función como factor de transcripción.
• Se expresa principalmente en hojas, tallos y plántulas, con niveles más bajos en frutos, flores y raíces, lo que indica su importancia en el crecimiento vegetativo.
• Está sujeto a corte y empalme alternativo, generando variantes proteicas que pueden ajustar con precisión su actividad en diferentes contextos del desarrollo y del entorno.
• Peso molecular: 48,4 kDa (calculado a partir de la secuencia); anotado como proteoma de referencia y relacionado con la señalización de fitocromos, la regulación transcripcional y las respuestas al estrés.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 300-400 de PIF4 de Arabidopsis (NP_565991.2). Debido a la naturaleza policlonal de este anticuerpo, puede reconocer múltiples epítopos y potencialmente presentar reactividad cruzada con proteínas bHLH estrechamente relacionadas; se recomienda validarlo en el sistema experimental específico.
• Para Western blot, utilice extractos celulares totales o enriquecidos en núcleos de tejidos de Arabidopsis thaliana, como plántulas u hojas, donde PIF4 se expresa en gran medida. La detección óptima puede requerir la optimización del bloqueo y de la dilución del anticuerpo.
• Este anticuerpo es adecuado para ELISA, que puede utilizarse para la detección cuantitativa de los niveles de proteína PIF4 en lisados vegetales. Considere utilizar una curva estándar con proteína PIF4 recombinante para una cuantificación precisa.
• Dado que PIF4 participa en las vías de señalización lumínica y térmica, las condiciones experimentales (régimen de luz y temperatura) deben controlarse cuidadosamente para evitar una modulación no deseada de la expresión de PIF4.
• El peso molecular previsto es de 48 kDa; controle la posible aparición de bandas de degradación e incluya inhibidores de proteasas durante la preparación de las muestras.

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