Anticuerpo policlonal anti-PIK3CA para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42336

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: función y localización de PIK3CA

• PIK3CA codifica la subunidad catalítica p110-alfa de PI3K, una quinasa lipídica que fosforila el fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato (PtdIns(4,5)P2) para generar fosfatidilinositol 3,4,5-trisfosfato (PIP3), un segundo mensajero fundamental.
  Referencias relacionadas: PMID:15135396, PMID:23936502, PMID:28676499
• PIP3 recluta a la membrana proteínas que contienen dominios de homología con pleckstrina (PH), como AKT1 y PDPK1, iniciando cascadas de señalización que promueven el crecimiento, la proliferación, la supervivencia y la motilidad celular, así como la reorganización del citoesqueleto.
• PIK3CA presenta actividad intrínseca de serina-proteína quinasa, lo que permite la autofosforilación de la subunidad reguladora p85-alfa y la fosforilación de sustratos como 4EBP1 y H-Ras, modulando potencialmente las vías posteriores.
  Referencias relacionadas: PMID:23936502, PMID:28676499
• Es activada por receptores tirosina quinasas (por ejemplo, EGFR, el receptor de insulina y VEGFR) y por RAS, desempeñando funciones esenciales en la señalización de factores de crecimiento, la angiogénesis y el desarrollo vascular.
• PIK3CA está clasificado como un protooncogén; las mutaciones somáticas de ganancia de función se detectan con frecuencia en una amplia variedad de cánceres humanos, impulsando la activación descontrolada de la vía PI3K/AKT.
• La proteína también está implicada en la fagocitosis y la pinocitosis, aunque los mecanismos exactos aún no están completamente caracterizados (por similitud).

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno comprende los aminoácidos 401–600 de PIK3CA humano; esta región central está bien conservada entre humanos, ratones y ratas, de acuerdo con la reactividad cruzada descrita.
• En Western blot, PIK3CA migra con un peso molecular previsto de aproximadamente 124 kDa; asegúrese de obtener una resolución suficiente mediante electroforesis en gel y transferencia.
• Valide el rendimiento del anticuerpo en lisados de controles positivos relevantes (por ejemplo, líneas celulares cancerosas que sobreexpresen PIK3CA o que hayan sido estimuladas con factores de crecimiento) antes de utilizarlo en muestras experimentales.
• Para la inmunohistoquímica (IHC-P), optimice los protocolos de recuperación antigénica (por ejemplo, la recuperación de epítopos inducida por calor) y considere ajustar la concentración del anticuerpo para obtener una tinción específica.
• Dado que PIK3CA participa en numerosas redes de señalización, incluya inhibidores adecuados de las vías en los estudios funcionales si utiliza el anticuerpo para la codetección o la precipitación.

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