Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-PIKFYVE para WB, ELISA - Q9Y2I7

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PIKFYVE

• PIKFYVE, también conocido como PIP5K3, es una cinasa de doble especificidad de lípidos y proteínas de serina que sirve como la única enzima responsable de sintetizar fosfatidilinositol 3,5-bisfosfato (PtdIns(3,5)P2) a partir de fosfatidilinositol 3-fosfato (PubMed:17556371, PubMed:41639454). Referencias relacionadas: PMID:17556371 | PMID:41639454
• La proteína contiene un dominio de dedo de zinc FYVE en el extremo N-terminal que la dirige a las membranas endosomales, donde se localiza principalmente en endosomas tempranos y tardíos, fagosomas y vesículas citoplasmáticas.
• PIKFYVE es un regulador crítico de la homeostasis de las membranas intracelulares, controlando la fisión, fusión y maduración de los endosomas; es esencial para la transición de endosomas tempranos a tardíos y para la función lisosomal (PubMed:30612035, PubMed:22621786). Referencias relacionadas: PMID:30612035 | PMID:22621786
• A través de su actividad de cinasa de lípidos, PIKFYVE regula la autofagia, la maduración de vacuolas y la recuperación de nutrientes al facilitar el reciclaje del contenido lisosomal de vuelta a la red de endosomas (PubMed:27623384). Referencias relacionadas: PMID:27623384
• La cinasa también desempeña un papel en la señalización de la insulina y la translocación de GLUT4, contribuyendo así a la homeostasis sistémica de glucosa (Por similitud).
• En las células inmunes, PIKFYVE es necesario para la fusión fagosoma-lisosoma, la generación de ROS y la presentación de antígenos a través del MHC de clase II, procesos vitales para la inmunidad innata y adaptativa (PubMed:28779020, PubMed:30612035). Referencias relacionadas: PMID:28779020 | PMID:30612035
• La autofosforilación de PIKFYVE regula a la baja su actividad de cinasa de lípidos y estimula la fosfatasa de lípidos FIG4, creando un bucle regulador que ajusta finamente los niveles de PtdIns(3,5)P2 (PubMed:33098764). Referencias relacionadas: PMID:33098764
• Notablemente, la enzima es secuestrada por coronavirus como el SARS-CoV y el SARS-CoV-2 para facilitar la entrada celular a través de la endocitosis.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Dado que el inmunógeno abarca los aminoácidos 269–545 de PIKFYVE humano, se espera que el anticuerpo reconozca la proteína endógena en muestras de humano, ratón y rata. Para la transferencia Western (Western blotting), tenga en cuenta el alto peso molecular (~237 kDa); use un gel de acrilamida de bajo porcentaje (p. ej., 6–8%) y tiempos de transferencia extendidos para asegurar una transferencia de proteína eficiente.
• Para ELISA, este anticuerpo se puede utilizar como reactivo de captura o detección para la proteína PIKFYVE recombinante; confirme las concentraciones de recubrimiento óptimas empíricamente.
• Considere incluir controles positivos y negativos apropiados, como lisados de células con expresión conocida de PIKFYVE, y valide el anticuerpo en el sistema experimental relevante.

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