Anticuerpo monoclonal de conejo anti-PKA C-alfa para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P17612

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de PKA C-alfa

• PKA C-alfa, codificada por PRKACA, es la subunidad catalítica alfa de la proteína cinasa dependiente de cAMP. Existen dos isoformas: la isoforma 1 se expresa de forma ubicua, mientras que la isoforma 2 es específica de los espermatozoides y se encuentra enriquecida en los espermatocitos paquitéNICOS.
• Como cinasa de serina/treonina, fosforila numerosos sustratos en el citoplasma y el núcleo, incluidos NFKB1 (PubMed:15642694), VASP (PubMed:15642694, PubMed:20356841), RYR2 (PubMed:17693412) y ABL1 (PubMed:15178447). Estos eventos regulan la agregación plaquetaria, la señalización del calcio y la capacitación espermática. Referencias relacionadas: PMID:15642694, PMID:20356841, PMID:17693412, PMID:15178447
• Se localiza en múltiples compartimentos, incluidos el citoplasma, el núcleo, la membrana celular, las mitocondrias, los cilios y las vesículas secretoras, lo que refleja sus diversos roles reguladores.
• En la vía de señalización Hedgehog, PKA C-alfa actúa como un inhibidor clave al fosforilar los factores de transcripción GLI (PubMed:16705181). Esta fosforilación promueve el procesamiento de GLI e impide la activación de los genes diana, un proceso antagonizado por el secuestro mediado por SMO (PubMed:36202993, PubMed:39138140). Referencias relacionadas: PMID:16705181, PMID:36202993, PMID:39138140
• La proteína está miristoilada y contiene dominios de unión a nucleótidos y dominios de cinasa, por lo que se clasifica como una lipoproteína y transferasa. Las variantes asociadas a enfermedades están relacionadas con el síndrome de Cushing.
• También fosforila CDC25B para impedir la reanudación de la meiosis en ovocitos detenidos en la profase (por similitud) y regula las uniones estrechas mediante la fosforilación de CLDN3 (PubMed:15905176). Referencias relacionadas: PMID:15905176

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aminoácidos 1-351 de la PKA C-alfa humana) abarca casi toda la proteína, lo que sugiere el reconocimiento de ambas isoformas. Considere validar la especificidad de la isoforma utilizando muestras específicas de cada isoforma (por ejemplo, células espermáticas para la isoforma 2).
• Para la transferencia Western, el peso molecular esperado es de aproximadamente 40–41 kDa. Utilice controles positivos adecuados (por ejemplo, lisados de HeLa y Jurkat) y valide el producto en su tejido diana.
• En inmunofluorescencia/ICC, se espera tinción nuclear y citoplasmática; verifique la localización subcelular en sus condiciones experimentales.
• Para ELISA, combínelo con un anticuerpo de captura adecuado y confirme el rendimiento con PKA C-alfa recombinante o muestras biológicas pertinentes.

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