Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-PKACα para WB y ELISA - P17612

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PKACα

• PKACα (PRKACA) es la subunidad catalítica alfa de la proteína quinasa dependiente de cAMP. Existen dos isoformas: la isoforma 1 ubicua y la isoforma 2 específica de esperma, enriquecida en espermatocitos paquitenos.
• Fosforila numerosos sustratos citoplasmáticos y nucleares, incluyendo CDC25B, ABL1, NFKB1, histona H1.4 y VASP, regulando el ciclo celular, la transcripción y la motilidad. Referencias relacionadas: PMID:15642694, PMID:15905176, PMID:16387847
• En plaquetas, PKACα se compleja con NF-κB e IκBα para mantener la quiescencia; la estimulación por agonistas disocia el complejo, liberando a PKACα para fosforilar VASP y promover la agregación. Referencias relacionadas: PMID:15642694, PMID:20356841
• PKACα inhibe la señalización de smoothened al fosforilar los factores de transcripción GLI (GLI1/2/3), desencadenando su procesamiento y bloqueando la expresión de genes diana en ausencia de ligandos hedgehog. Referencias relacionadas: PMID:16705181
• La secuestro de PKACα por el receptor Smoothened en la membrana celular evita la fosforilación de GLI, permitiendo la activación de la vía. Referencias relacionadas: PMID:36202993, PMID:39138140
• PKACα potencia la actividad del canal de calcio RYR2, alterando la dinámica de liberación de calcio y contribuyendo a la liberación de Ca²⁺ inducida por sobrecarga de reservorios. Referencias relacionadas: PMID:17693412
• Regula negativamente a mTORC1 mediante la fosforilación de RPTOR, vinculando la señalización del cAMP con la detección de nutrientes. Referencias relacionadas: PMID:31112131
• A nivel subcelular, PKACα se encuentra en el citoplasma, el núcleo, la membrana celular, las mitocondrias y las proyecciones celulares (cilios/flagelos), reflejando sus multifacéticas funciones.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a una región conservada (aminoácidos 251-351) dentro del dominio catalítico; es posible una reactividad cruzada con otras subunidades catalíticas de PKA (PRKACB, PRKACG), por lo que debe verificar la especificidad en su sistema.
• En Western blot, se anticipa una banda principal a ~39–40 kDa; las bandas adicionales pueden representar isoformas o productos de degradación. Use controles positivos y negativos apropiados.
• Para ELISA, titule tanto el antígeno de recubrimiento como el anticuerpo para optimizar la relación señal-ruido; considere usar un fragmento recombinante de PKACα como estándar.
• Dado su rol en múltiples vías de señalización, trate las muestras con inhibidores de fosfatasas para preservar las interacciones dependientes de la fosforilación si estudia dichos contextos.

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