Anticuerpo policlonal de conejo anti-PKC alfa para WB, IHC-P, ELISA - P17252

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la PKC alfa

• La proteína cinasa C alfa (PKCα) es una serina/treonina-proteína cinasa activada por calcio y dependiente de fosfolípidos y diacilglicerol (DAG), codificada por el gen PRKCA. Pertenece a la familia de las PKC y contiene dominios característicos de dedos de zinc y un sitio de unión a ATP.
• La PKCα desempeña un papel central en la proliferación, diferenciación, apoptosis, migración y adhesión celular. Promueve el crecimiento celular mediante la señalización MAPK/ERK mediada por RAF1 y también puede inducir la detención del ciclo celular al aumentar la expresión de los inhibidores de CDK CDKN1A y CDKN1B.
• Presenta actividad antiapoptótica en células cancerosas; por ejemplo, fosforila BCL2 para bloquear la apoptosis y suprime la activación de IGFBP3 mediada por p53/TP53 en células de glioma.
• Se expresa abundantemente en muchos tipos de cáncer y actúa como promotor tumoral, contribuyendo a fenotipos malignos en gliomas y carcinomas mamarios.
• En el sistema cardiovascular, regula negativamente la contractilidad miocárdica mediante la fosforilación de la troponina T cardíaca (TNNT2/CTNT) y media la hipertrofia de los cardiomiocitos a través de la señalización MAPK1/3 (ERK1/2).
• Participa en la angiogénesis, la agregación plaquetaria y la inflamación. Regula la migración de las células endoteliales y la señalización de VEGFA, y modula las respuestas de los macrófagos inducidas por LPS.
• Su localización subcelular incluye el citoplasma, la membrana celular, la membrana mitocondrial y el núcleo. Se produce una translocación dependiente del estímulo, como el movimiento hacia los lamelipodios tras una lesión o hacia el núcleo durante la diferenciación de los macrófagos.
• Entre sus objetivos de fosforilación adicionales se incluyen DOCK8 (que regula la migración de las células T mediante la activación de CDC42), KLHL3 (que modula la interacción con WNK4 en respuesta a la angiotensina II) y LRRK1 (que controla el tráfico de proteínas RAB). Referencias relacionadas: PMID:28028151 PMID:25313067 PMID:36040231

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a una región C-terminal (aa 573–672) de la PKC alfa humana. Esta secuencia está altamente conservada entre humanos, ratones y ratas, lo que respalda la reactividad cruzada observada.
• Para Western blot, considere comenzar con diluciones entre 1:500 y 1:2000 y valide el anticuerpo en lisados de líneas celulares o tejidos que expresen PKCα (por ejemplo, cerebro, corazón y líneas celulares cancerosas).
• En IHC-P, puede ser necesaria la recuperación antigénica; optimice las condiciones de fijación y recuperación para su tipo de muestra. Incluya controles positivos y negativos adecuados.
• Como se trata de un anticuerpo policlonal, el rendimiento puede variar entre lotes; se recomienda titular cada lote nuevo y confirmar la especificidad en el sistema modelo correspondiente.

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