PolymAb® de conejo anti-PKC alfa para WB y ELISA - P17252

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de PKC alfa

• La proteína quinasa C de tipo alfa (PKCα) es una serina/treonina quinasa dependiente de calcio, fosfolípidos y diacilglicerol (DAG), codificada por el gen PRKCA. Pertenece a la familia de las proteínas quinasas C y contiene dominios reguladores de dedo de zinc y un dominio quinasa catalítico.
• En biología del cáncer, la PKCα se expresa de forma alta en gliomas y cánceres de mama, donde actúa como promotor tumoral y contribuye a los fenotipos malignos al regular la proliferación celular, la apoptosis y la migración a través de vías como MAPK/ERK.
• La PKCα desempeña funciones cardiovasculares cruciales: modula negativamente la contractilidad miocárdica al fosforilar la troponina T cardíaca (TNNT2), promueve la hipertrofia cardíaca a través de la señalización ERK1/2 y es necesaria para la hipertrofia de cardiomiocitos tras la estimulación con PMA.
• En angiogénesis y función plaquetaria, la PKCα media la proliferación de células endoteliales y la formación de tubos inducida por VEGFA, y activa la integrina plaquetaria αIIbβ3 a través de la vía RAP1GAP, facilitando la agregación plaquetaria inducida por calcio y la formación de trombos.
• La PKCα fosforila sustratos descendentes clave: fosforila el factor de intercambio de guanina DOCK8 de CDC42 para aumentar la actividad de CDC42 durante la migración de células T, fosforila KLHL3 para disminuir su interacción con WNK4 en respuesta a la angiotensina II, y activa LRRK1, que participa en el transporte intracelular mediado por RAB. Referencias relacionadas: PMID:28028151 PMID:25313067 PMID:36040231
• Subcelularmente, la PKCα se localiza dinámicamente en el citoplasma, la membrana celular, la membrana mitocondrial y el núcleo, translocándose entre compartimentos en respuesta a estímulos. Sus modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación y acetilación.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blotting, se recomienda usar controles positivos como lisados celulares de HeLa, MCF-7 o A431, que expresan PKCα endógena. Se debe determinar empíricamente un rango de dilución inicial.
• Dado que el inmunógeno es la proteína PKCα humana recombinante y se ha descrito reactividad cruzada con ratón y rata, valide el anticuerpo en el sistema de muestras correspondiente para confirmar la detección específica por especie.
• Para aplicaciones de ELISA, evalúe el emparejamiento con un anticuerpo de captura adecuado y optimice las condiciones del ensayo; la proteína PKCα recombinante puede usarse como estándar.
• Los cambios conformacionales dependientes de fosforilación pueden influir en la unión del anticuerpo; si estudia la PKCα activada, considere el pretratamiento con forbol ésteres (por ejemplo, PMA) u otros estímulos en ensayos celulares.

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