Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-PKM1/2 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P14618

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PKM1/2

• Cataliza el paso final limitante de la velocidad de la glucólisis transfiriendo un grupo fosforilo desde fosfoenolpiruvato (PEP) a ADP, generando ATP.
  Referencias relacionadas:
  PMID:15996096 | PMID:1854723 | PMID:20847263
• La proporción entre la forma tetramérica altamente activa y la forma dimérica casi inactiva determina si los carbonos de la glucosa se canalizan hacia procesos biosintéticos o se utilizan para la producción de ATP glucolítico, un interruptor crítico para la proliferación y supervivencia de las células tumorales.
  Referencias relacionadas:
  PMID:15996096 | PMID:1854723 | PMID:20847263
• La isoforma M2 (PKM2), predominante durante la embriogénesis y en los tumores, exhibe una baja actividad basal de piruvato quinasa y requiere activación alostérica por D-fructosa 1,6-bisfosfato. Más allá de su papel metabólico, PKM2 se transloca al núcleo tras recibir señales, donde actúa como una proteína quinasa, fosforilando STAT3 en Tyr-705 y la histona H3 en Thr-11 para impulsar la transcripción de genes como VEGFA y CD274, promoviendo la angiogénesis y la evasión inmune.
  Referencias relacionadas:
  PMID:18337823 | PMID:20847263 | PMID:18191611 | PMID:21620138 | PMID:22056988 | PMID:22306293 | PMID:22901803 | PMID:24120661 | PMID:33314660 | PMID:26787900
• La isoforma M1 (PKM1), expresada en tejidos adultos, muestra una actividad constitutivamente alta de piruvato quinasa independiente de los activadores alostéricos, reemplazando funcionalmente a M2 después del nacimiento.
  Referencias relacionadas:
  PMID:18337823 | PMID:20847263
• La localización subcelular es dinámica: PKM1/2 reside predominantemente en el citoplasma pero, en el caso de PKM2, varios estímulos como el EGF desencadenan la translocación nuclear, donde la homodimerización permite sus funciones de proteína quinasa.
  Referencias relacionadas:
  PMID:22056988 | PMID:22306293 | PMID:22901803
• Especificidad de tejido: PKM2 se enriquece específicamente en células proliferantes, incluidas las células madre embrionarias y las células cancerosas, mientras que PKM1 se encuentra en muchos tejidos adultos pero está notablemente ausente en las células tumorales.
  Referencias relacionadas:
  PMID:18337823
• Las modificaciones postraduccionales, que incluyen acetilación, fosforilación, hidroxilación y ubiquitinación, ajustan finamente la actividad, estabilidad y tráfico subcelular de PKM1/2, destacando su papel como centro regulador en el metabolismo y la señalización.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca los residuos 11–221 de PKM1/2 (NP_001193728.1), una región conservada entre PKM1 y PKM2; los investigadores deben validar la especificidad de la isoforma en su sistema experimental.
• Para la transferencia Western (WB), se espera una banda alrededor de 58 kDa. Incluya lisados de control positivos y negativos apropiados (p. ej., cáncer vs. tejido normal) para confirmar la reactividad.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), se recomienda la optimización de la recuperación de antígenos y la dilución del anticuerpo para secciones fijadas en formol e incluidas en parafina.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), optimice la fijación y la permeabilización para preservar la localización dual citoplasmática/nuclear de PKM2 bajo estímulos específicos.
• En aplicaciones de ELISA, determine empíricamente la concentración óptima de anticuerpo y las condiciones de recubrimiento utilizando protocolos estándar indirectos o sándwich.

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