Anticuerpo Monoclonal Rabbit PolymAb® Anti-PKM1/2 para WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P14618

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PKM1/2

• PKM1/2, codificado por el gen PKM, es una piruvato quinasa que cataliza el paso limitante final de la glucólisis, transfiriendo un grupo fosforilo desde fosfoenolpiruvato (PEP) a ADP para generar ATP. Referencias relacionadas: PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• El gen PKM produce dos isoformas principales a través del splicing alternativo: el PKM2 embrionario y asociado a tumores, y el PKM1 específico de tejidos adultos, que difieren en su regulación y actividad. Referencias relacionadas: PMID:18337823, PMID:20847263
• La actividad de PKM2 está controlada por un interruptor alostérico entre un tetrámero muy activo y un dímero casi inactivo; este cambio dicta si la glucosa se usa para la producción de ATP o se desvía a vías biosintéticas, un proceso crítico para la proliferación y supervivencia de las células tumorales. Referencias relacionadas: PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• Más allá de su rol metabólico citoplasmático, PKM2 se transloca al núcleo donde actúa como una proteína quinasa, fosforilando objetivos como STAT3 (Tyr-705) y la histona H3 (Thr-11) para modular la transcripción, incluyendo la promoción de la expresión de VEGFA en la angiogénesis. Referencias relacionadas: PMID:18191611, PMID:21620138, PMID:22056988, PMID:22306293, PMID:22901803, PMID:24120661
• PKM2 se expresa específicamente en células proliferantes como las células madre embrionarias y las células cancerosas, mientras que PKM1 se encuentra predominantemente en tejidos adultos normales. Referencias relacionadas: PMID:18337823
• La proteína se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, consistente con sus roles duales en el metabolismo y la regulación transcripcional.
• La proteína PKM2 sufre extensas modificaciones post-traduccionales—incluyendo acetilación, metilación, fosforilación e hidroxilación—que regulan su actividad enzimática, localización y funciones no metabólicas.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para aplicaciones de Western blot e inmunohistoquímica, use lisados celulares o de tejidos de origen humano, ratón o rata, ya que el anticuerpo muestra una amplia reactividad cruzada.
• Dada la localización dual citoplasmática y nuclear de PKM1/2, considere protocolos de fraccionamiento apropiados o tinción simultánea en experimentos de IF/ICC para confirmar la distribución subcelular.
• Al evaluar funciones específicas de PKM2, valide la especificidad de la detección usando líneas celulares deficientes en PKM2 o knockdown mediado por siRNA, ya que el inmunógeno abarca una región conservada entre isoformas.
• Optimice las diluciones del anticuerpo para cada aplicación mediante una serie de diluciones, ya que las concentraciones de trabajo óptimas pueden variar entre los tipos de muestras y los sistemas de detección.

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