Anticuerpo policlonal de conejo específico para PKM2 para WB, IF/ICC, ELISA - P14618

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PKM2

• PKM2 cataliza el paso limitante final de la glucólisis, convirtiendo fosfoenolpiruvato en piruvato con producción de ATP, y su relación tetrámero-dímero controla el cambio entre la generación de energía y el suministro de precursores biosintéticos, crucial para la supervivencia de las células tumorales.
  Referencias relacionadas: PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• PKM2 es la isoforma embrionaria con baja actividad constitutiva de piruvato quinasa, que requiere activación alostérica por D-fructosa-1,6-bisfosfato (FBP); es reemplazada por la isoforma de alta actividad PKM1 en la mayoría de los tejidos adultos.
  Referencias relacionadas: PMID:18337823, PMID:20847263
• En el núcleo, PKM2 funciona como una proteína quinasa, fosforilando STAT3 en Tyr-705 e histona H3 en Thr-11 para impulsar la transcripción de genes como VEGFA y CD274, vinculando el metabolismo con la expresión génica.
  Referencias relacionadas: PMID:18191611, PMID:21620138, PMID:22056988, PMID:22306293, PMID:22901803, PMID:24120661, PMID:33314660
• PKM2 promueve la tumorigénesis a través de la coactivación transcripcional con NF-κB y FOXM1, y también participa en vías de muerte celular independientes de caspasa.
  Referencias relacionadas: PMID:17308100, PMID:26787900, PMID:33314660
• PKM2 experimenta diversas modificaciones postraduccionales (acetilación, fosforilación, metilación, hidroxilación, S-nitrosilación y ubiquitinación) que ajustan sus actividades metabólicas y no metabólicas.
• También actúa como una proteína de unión a hormonas tiroideas citosólica (CTHBP) y como una proteína de interacción Opa (OIP-3), lo que refleja funciones multifuncionales más allá de la glucólisis.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno se encuentra dentro de los aminoácidos 380–480 de PKM2 humano, una región que puede diferenciarlo de la variante de empalme PKM1; incluya controles de PKM1 al evaluar la especificidad de la isoforma.
• Para Western blot, espere una banda a ~58kDa; use lisados de líneas celulares de cáncer humano, de ratón o de rata (p. ej., HeLa, MCF-7) e incluya controles positivos y negativos.
• En inmunofluorescencia o ICC, anticipe tinción tanto citoplasmática como nuclear; optimice los protocolos de fijación y permeabilización para preservar los epítopos en ambos compartimentos.
• Para aplicaciones de ELISA, el inmunógeno de péptido sintético puede servir como control positivo; considere emparejarlo con un anticuerpo de detección que reconozca un epítopo distinto para ensayos tipo sándwich.

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