Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-PLK1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P53350

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PLK1

• Serina/treonina proteína cinasa que realiza varias funciones esenciales durante toda la fase M, incluyendo la regulación de la maduración del centrosoma, el ensamblaje del huso, la eliminación de cohesinas, la inactivación de los inhibidores de APC/C y la regulación de la salida mitótica y la citocinesis. Referencias relacionadas: PMID:11202906, PMID:12207013, PMID:12447691
• Fosforila una amplia gama de sustratos (p. ej., BORA, BUB1B, CCNB1, CDC25C, FOXM1) reconociendo motivos pre-fosforilados a través de sus dominios de caja POLO, amplificando así las señales regulatorias mitóticas. Referencias relacionadas: PMID:11202906, PMID:12207013, PMID:12447691
• Clave para las funciones del centrosoma y el ensamblaje del huso bipolar; fosforila KIZ, NEDD1 y NINL para promover la reclutación del complejo de anillo de gamma-tubulina y la organización del centrosoma. Referencias relacionadas: PMID:16980960, PMID:19509060, PMID:12852856
• Regula la salida mitótica y la citocinesis mediante la fosforilación de CEP55, ECT2, KIF20A/MKLP2, PRC1 y RACGAP1, creando sitios de acoplamiento en el huso central para el factor de intercambio de GTP Rho ECT2 y la formación del surco de escisión. Referencias relacionadas: PMID:12939256, PMID:16247472, PMID:17351640, PMID:19468300, PMID:19468302
• Impulsa la transición G2/M fosforilando CDC25C, WEE1, PKMYT1 y CCNB1, lo que conduce a la activación de CDK1; también mejora la actividad transcripcional de FOXM1. Referencias relacionadas: PMID:11202906, PMID:12447691, PMID:12524548, PMID:19160488
• Participa en las funciones del cinetocoro y la cohesión de las cromátidas hermanas; fosforila BUB1B, FBXO5 y STAG2 para regular la unión del cinetocoro, el punto de control del ensamblaje del huso y la disociación de la cohesina. Referencias relacionadas: PMID:15148369, PMID:15469984, PMID:17376779, PMID:17617734, PMID:18331714
• Exhibe una localización subcelular dinámica: núcleo, centrosoma, cinetocoro, huso y cuerpo medio. Se expresa altamente en placenta y colon.
• Además, contribuye a la recuperación del daño en el ADN, la desintegración de la envoltura nuclear, la respuesta al choque térmico y la biogénesis de cilios a través de la fosforilación de varios objetivos (p. ej., DCTN1, DZIP1, HSF1). Referencias relacionadas: PMID:18615013, PMID:18662541, PMID:20679239, PMID:15661742, PMID:18794143, PMID:27979967, PMID:37440612, PMID:37674080

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 304–603, cubriendo los dominios de caja POLO C-terminales; esta región es altamente conservada, lo que respalda la reactividad cruzada con el PLK1 de ratón y rata.
• Para la transferencia Western (Western blotting), espere una banda a aproximadamente 68 kDa; valide con los controles positivos y negativos apropiados, y considere el uso de líneas celulares sincronizadas en mitosis para una detección óptima.
• En IHC-P e IF/ICC, optimice las condiciones de fijación/permeabilización; PLK1 exhibe una localización dinámica (centrosomas, cinetocoros, cuerpo medio) que puede requerir una permeabilización suave para preservar la antigenicidad.
• Dado que este es un anticuerpo policlonal, la titulación es esencial para cada aplicación; comience con 1:500–1:2000 para WB y ajuste según la abundancia del objetivo y el método de detección.
• Para ELISA, el anticuerpo puede usarse como reactivo de captura o detección; el emparejamiento con un anticuerpo monoclonal anti-PLK1 podría mejorar la especificidad en ensayos sándwich.
• Verifique la reactividad cruzada en su sistema modelo; aunque reacciona con humano, ratón y rata, los niveles de expresión del objetivo varían entre los tejidos y las líneas celulares.

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