Anticuerpo Policlonal Anti-PLK3 para WB, ELISA - Q9H4B4

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PLK3

• Identidad y familia proteica: La serina/treonina-proteína quinasa PLK3 (también conocida como quinasa serina/treonina proteica inducible por citoquinas, quinasa inducible por FGF, quinasa relacionada con la proliferación) es un miembro de la familia de quinasas similares a polo. Contiene un dominio catalítico y dominios caja POLO que median el reconocimiento de sustratos a través de la unión dependiente de fosforilación.
• Regulación del ciclo celular: PLK3 es necesaria para la entrada en la fase S y la citocinesis. Regula el punto de control G2 y la progresión mitótica fosforilando CDC25C y BCL2L1, influyendo en las transiciones del ciclo celular.
• Respuesta al estrés y daño del ADN: PLK3 se activa rápidamente ante estímulos de estrés como radiación ionizante, especies reactivas de oxígeno (ROS), estrés hiperosmótico, irradiación UV e hipoxia. Fosforila p53/TP53 para promover la apoptosis, CHEK2 para reforzar el punto de control G2/M y p73/TP73 para inhibir sus funciones proapoptóticas.
• Sustratos de fosforilación clave: Los sustratos de PLK3 incluyen ATF2, BCL2L1, CDC25A, CDC25C, CHEK2, HIF1A, JUN, p53/TP53, p73/TP73, PTEN, TOP2A y VRK1. Estas interacciones median sus roles en el control de puntos de control, apoptosis y dinámica del aparato de Golgi.
• Desensamblaje del Golgi: PLK3 participa en la fragmentación del Golgi durante la mitosis a través de una vía dependiente de MEK1/MAP2K1, fosforilando VRK1 en el aparato de Golgi, asegurando una partición adecuada de los orgánulos.
• Localización subcelular: PLK3 presenta una localización dinámica en el citoplasma, núcleo, nucléolo, aparato de Golgi y centrosoma, lo que coincide con sus múltiples funciones en la señalización del ciclo celular y el estrés.
• Expresión tisular y por diferenciación: Los transcritos se detectan en alta concentración en placenta, pulmón, músculo esquelético, corazón, páncreas, ovarios y riñón; débilmente en hígado y cerebro. En células hematopoyéticas, PLK3 se expresa de forma fuerte y específica en macrófagos terminalmente diferenciados. La expresión está regulada a la baja en tumores pulmonares primarios.
• Modificaciones postraduccionales y palabras clave: PLK3 se clasifica como una fosfoproteína (identificación proteómica) con actividad de unión a ATP y actividad de serina/treonina-proteína quinasa. Las palabras clave de UniProt incluyen apoptosis, ciclo celular, daño del ADN, aparato de Golgi y proteoma de referencia.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 487–646 (región C-terminal), que cubre parte del segundo dominio de caja POLO. Esta región puede ofrecer especificidad dentro de la familia PLK; si es necesario, la reactividad cruzada con PLK1 o PLK2 debe confirmarse experimentalmente.
• Para Western blot (WB), el peso molecular predicho es de ~72 kDa. Valide la detección en la especie prevista (humano, ratón, rata) y el tipo de muestra. Utilice controles de carga adecuados y considere el silenciamiento mediado por siRNA o lisados de knockout para verificar la identidad de la banda.
• Las aplicaciones de ELISA se pueden optimizar probando condiciones de recubrimiento y diluciones del anticuerpo; el anticuerpo se suministra como policlonal de conejo, adecuado para protocolos estándar de ELISA indirecto.
• Para estudiar las vías inducidas por estrés, trate las células con agentes dañinos del ADN (por ejemplo, etopósido, UV), inductores de ROS (por ejemplo, H₂O₂) o miméticos de hipoxia (por ejemplo, CoCl₂) y confirme la activación de PLK3 o cambios en la expresión mediante WB.
• Para inmunofluorescencia o inmunohistoquímica, los usuarios deben establecer condiciones de fijación y permeabilización compatibles con los compartimentos subcelulares detectados (citoplasmático, nuclear, Golgi). Tenga en cuenta que los niveles endógenos de PLK3 pueden ser bajos en algunos tipos de células; puede ser necesario el enriquecimiento o la amplificación de la señal.

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