Anticuerpo policlonal de conejo Anti-PLOD2/LH2 para WB y ELISA - O00469

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PLOD2/LH2

• El gen PLOD2 codifica la procollagen-lisina,2-oxoglutarato 5-dioxigenasa 2, también conocida como lisil hidroxilasa 2 (LH2), una enzima perteneciente a la familia de las dioxigenasas dependientes de 2-oxoglutarato.
• Esta enzima cataliza la hidroxilación de residuos de lisina en las secuencias Xaa-Lis-Glicina del colágeno, formando hidroxilisina. Estos residuos modificados son cruciales para la unión de unidades de hidratos de carbono y para la estabilidad de los enlaces cruzados intermoleculares del colágeno.
• PLOD2 se localiza en la membrana del retículo endoplásmico rugoso y en el citoplasma, donde ejerce su función enzimática durante el procesamiento del procolágeno.
• Existen dos isoformas principales debido al splicing alternativo; la isoforma 2 se expresa selectivamente en piel, pulmón, duramadre y aorta, mientras que ambas isoformas se detectan de forma generalizada en otros tejidos.
• La proteína se expresa de forma abundante en páncreas y músculo, lo que coincide con el alto recambio de colágeno en estos tejidos.
• Como miembro de la familia de genes PLOD, las mutaciones en PLOD2 se asocian a osteogénesis imperfecta y otras alteraciones del tejido conectivo, lo que pone de relieve su papel en la biosíntesis y la integridad del colágeno.
• La enzima requiere hierro y vitamina C como cofactores para su actividad dioxigenasa, y sufre modificaciones postraduccionales que incluyen glicosilación y fosforilación.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blotting, el peso molecular predicho es de aproximadamente 85 kDa; se recomienda cargar escaladores de peso molecular adecuados y verificar la migración de la banda en los lisados de la especie correspondiente.
• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 260–380, una región que puede estar conservada entre humano, ratón y rata; no obstante, la reactividad cruzada debe validarse en el sistema experimental utilizado.
• Se pueden realizar aplicaciones de ELISA usando proteína PLOD2 recombinante o lisados celulares; se recomienda realizar una titulación del anticuerpo y utilizar reactivos de detección secundarios adecuados.
• Garantice una preparación correcta de las muestras para proteínas de membrana usando detergentes suaves para mantener la conformación nativa, ya que PLOD2 está asociada a la membrana del retículo endoplásmico rugoso.
• La inclusión de lisados de control positivo de páncreas o músculo (alta expresión endógena) puede ayudar a optimizar las condiciones de detección.

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