Anticuerpo monoclonal Anti-PLOD3/LH3 para WB, ELISA - O60568

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PLOD3/LH3

• PLOD3 (también conocido como LH3) es una enzima multifuncional que cataliza modificaciones postraduccionales de residuos de lisina en el procolágeno, incluyendo hidroxilación, galactosilación y glucosilación, procesos fundamentales para la estabilidad del colágeno y la integridad de la membrana basal. Referencias relacionadas: PMID:11956192 PMID:12475640 PMID:18298658
• Cataliza de forma redundante la formación de hidroxilisina en los motivos -Xaa-Lys-Gly- de los colágenos. Referencias relacionadas: PMID:11956192 PMID:12475640 PMID:18298658
• PLOD3 también transfiere galactosa a residuos de hidroxilisina, formando galactosil hidroxilisina. Referencias relacionadas: PMID:12475640 PMID:18298658 PMID:18834968
• Su papel esencial reside en la actividad glucosiltransferasa posterior, que produce residuos de 1,2-glucosilgalactosil-5-hidroxilisina. Referencias relacionadas: PMID:10934207 PMID:11896059 PMID:11956192
• PLOD3 es necesario para la biosíntesis y secreción normales de los colágenos de tipo IV y la formación de la membrana basal. Referencias relacionadas: PMID:18834968
• Se localiza principalmente en el retículo endoplásmico rugoso, el lumen del RE y la membrana del RE, y puede ser secretado al espacio extracelular.
• La proteína se expresa de forma ubicua, con niveles relativamente más altos en corazón, placenta y páncreas, y más bajos en pulmón, hígado y músculo esquelético. Referencias relacionadas: PMID:9724729 PMID:9582318
• PLOD3 es un miembro glicosilado y de unión a metales (hierro y manganeso) de las familias de dioxigenasas y glicosiltransferasas, y sus mutaciones están asociadas a enfermedades.
• También hidroxila y glicosila el dominio similar al colágeno de MBL1, lo que amplía su especificidad de sustrato. Referencias relacionadas: PMID:25419660

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 25-306 de PLOD3 humano, cubriendo una región probablemente accesible para la unión del anticuerpo. Para Western blot, se recomienda utilizar condiciones reductoras para detectar la banda de 85 kDa, y validar con lisados de líneas celulares humanas y de ratón que expresan PLOD3 de forma conocida (por ejemplo, corazón, placenta).
• El anticuerpo está validado para ELISA; para aplicaciones de ELISA sándwich, el emparejamiento con otro clon que reconozca un epitopo distinto puede mejorar la sensibilidad. La reactividad cruzada con ratón sugiere su utilidad en estudios con modelos de roedores, pero la reactividad cruzada con otras especies debe verificarse experimentalmente.
• Dado que PLOD3 es una proteína residente del RE y secretada, la preparación de muestras para WB puede beneficiarse de estrategias de fraccionamiento subcelular o enriquecimiento, especialmente para muestras con baja expresión endógena.

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