Anticuerpo policlonal de conejo Anti-PML+RARA para IF/ICC y ELISA - P29590 / P10276

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PML+RARA

• La proteína PML (proteína de leucemia promielocítica, TRIM19) es el componente estructural de los cuerpos nucleares de PML, funciona como una SUMO ligasa E3 de tipo RING y participa en la supresión tumoral, la regulación transcripcional, la apoptosis, la senescencia y la defensa antiviral. Referencias relacionadas: PMID:11500381, PMID:11575918, PMID:18391071, PMID:20972456, PMID:28250117
• En la leucemia promielocítica aguda (LPA), la translocación cromosómica t(15;17) genera la oncoproteína de fusión PML-RARA, que altera la formación normal de los cuerpos nucleares de PML y la señalización por ácido retinoico.
• PML presenta una potente actividad antiviral contra una amplia gama de virus de ADN y ARN, a menudo mediante el secuestro de componentes virales dentro de los cuerpos nucleares de PML; las isoformas PML-4 y PML-6 presentan una alta actividad de SUMO ligasa. Referencias relacionadas: PMID:20972456, PMID:28250117
• PML se localiza principalmente en el núcleo (nucleoplasma, cuerpos PML, nucléolo), pero también existen isoformas citoplasmáticas que pueden asociarse al retículo endoplásmico y a las membranas de los endosomas tempranos.
• La proteína sufre modificaciones postraduccionales clave que incluyen la SUMOilización, la fosforilación y la acetilación, que regulan su dinámica subcelular y sus interacciones.
• PML se considera un supresor tumoral y un protooncogén, dependiendo del contexto de la isoforma, y participa en la respuesta al daño del ADN, la regulación de la telomerasa y los ritmos circadianos.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los residuos 500-600 de PML y 1-100 de RARA, lo que indica especificidad por la unión de fusión; puede ser necesaria la validación de la reactividad con PML o RARA de tipo salvaje por separado.
• Para IF/ICC, se recomienda utilizar líneas celulares derivadas de LPA (por ejemplo, NB4) que expresen la fusión PML-RARA; un patrón nuclear micropunteado indica la alteración de los cuerpos PML normales.
• En ELISA, se recomienda realizar una titulación del anticuerpo frente a antígenos de péptido o PML-RARA recombinante para establecer las concentraciones de trabajo óptimas.
• Se informa de reactividad cruzada con muestras de rata, pero es recomendable realizar una alineación de secuencias de la región del inmunógeno en PML y RARA de rata para confirmar la conservación del epítopo.

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