Anticuerpo policlonal de conejo Anti-PMS2 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P54278

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PMS2

• PMS2 (homólogo 2 de la proteína PMS1) es un componente central del sistema de reparación de desajustes del ADN post-replicativo (MMR), donde forma heterodímeros con MLH1 para generar el complejo MutL alfa. Referencias relacionadas: PMID:30653781 PMID:35189042
• El reclutamiento de MutL alfa al desajuste está mediado por MutS alfa (MSH2-MSH6) o MutS beta (MSH2-MSH3), y el ensamblaje del complejo ternario con RFC y PCNA activa la actividad endonucleasa latente de PMS2, introduciendo roturas de una sola hebra cerca del desajuste.
• El mecanismo de discriminación de hebras depende de la metilación del ADN: la hebra recién sintetizada y no metilada se corta de forma preferente, lo que garantiza la corrección de los errores de replicación.
• Como endonucleasa, PMS2 genera puntos de entrada para la exonucleasa EXO1, que excisa la hebra que contiene el error, y también interactúa físicamente con las subunidades del cargador de pinza de la ADN polimerasa III, lo que sugiere un papel en el reclutamiento de la polimerasa replicativa para la síntesis de reparación.
• Más allá del MMR, PMS2 está implicado en la señalización del daño del ADN, desencadenando la detención del ciclo celular o la apoptosis en respuesta a lesiones extensas del ADN, actuando por lo tanto como supresor de tumores.
• PMS2 posee actividad ATPasa intrínseca; sin embargo, la hidrólisis de ATP puede no ser esencial para una reparación de desajustes eficiente en determinadas condiciones. Referencias relacionadas: PMID:35189042
• La proteína se localiza exclusivamente en el núcleo y está fosforilada en múltiples sitios. Las mutaciones en PMS2 están asociadas al cáncer colorrectal hereditario no polipósico (síndrome de Lynch) y otras neoplasias malignas.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 390–670 de la región C-terminal de la PMS2 humana, que contiene el sitio activo de la endonucleasa; se recomienda validar la reactividad en muestras que expresen variantes de PMS2 de longitud completa o truncadas.
• Para Western blot (WB), se espera una banda de aproximadamente 96 kDa; utilice un control positivo como lisados de células HeLa o HEK293, e incluya extractos nucleares para aumentar la señal.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC), PMS2 presenta un patrón de tinción nuclear; se recomienda una co-tinción con un marcador nuclear para confirmar la localización.
• Para inmunoprecipitación (IP), el anticuerpo puede extraer el complejo MutL alfa (MLH1-PMS2); valide la coprecipitación en las líneas celulares correspondientes.
• Se ha descrito reactividad cruzada con PMS2 de ratón; para estudios en ratón, verifique el rendimiento en el tejido o tipo celular previsto.
• Optimice las diluciones del anticuerpo para cada aplicación y sistema de muestra, ya que la reactividad puede variar en función de los niveles de expresión y las modificaciones post-traduccionales.

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