Anticuerpo policlonal de conejo anti-podoplanina para WB, IHC-P, ELISA - Q86YL7

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de la podoplanina

• La podoplanina (PDPN, también conocida como Aggrus, GP36, T1A) es una glicoproteína transmembranal de tipo I con dominios extracelular, transmembranal y citoplasmático. Sufre empalme alternativo y presenta un alto grado de sialilación.
• Mediante su unión a CLEC1B, la podoplanina activa la activación y agregación plaquetaria, un proceso clave para la separación de los vasos sanguíneos y linfáticos (PubMed:14522983, PubMed:15231832, PubMed:17222411). La interacción con CD9 atenúa esta agregación (PubMed:18541721). Referencias relacionadas: PMID:14522983 PMID:15231832 PMID:17222411 PMID:18541721
• La interacción con MSN o EZR promueve la transición epitelial-mesenquimal (EMT), lo que conduce a la fosforilación de ERZ y la activación de RHOA, aumentando así la migración celular y la capacidad invasiva (PubMed:17046996, PubMed:21376833). Referencias relacionadas: PMID:17046996 PMID:21376833
• La unión de la podoplanina a CD44 promueve la migración celular direccional en células epiteliales y tumorales (PubMed:20962267). También controla la estabilidad de los invadopodios y la degradación de la matriz extracelular a través de la vía RHOC-ROCK-LIMK-CFL1 (PubMed:25486435). Referencias relacionadas: PMID:20962267 PMID:25486435
• En los ganglios linfáticos, la podoplanina regula la adhesión y la contractilidad de las células reticulares fibroblásticas a través de las proteínas ERM y la activación de MYL9; la unión a CLEC1B induce relajación (Por similitud).
• La podoplanina se localiza principalmente en la membrana plasmática y se enriquece en las proyecciones membranosas: lamelipodios, filopodios, microvilli, pliegues e invadopodios. También se transporta a las balsas membranosas y presenta polaridad apical/basolateral.
• Se expresa en altos niveles en placenta, pulmón, músculo esquelético y cerebro; se encuentra sobreexpresada en tumores colorrectales y algunos carcinomas orales escamosos.
• En queratinocitos, la expresión de podoplanina genera una morfología alargada, reorganización del citoesqueleto de actina, aumento de la motilidad y disminución de la adhesión celular (PubMed:15515019). Referencias relacionadas: PMID:15515019

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno cubre los aminoácidos 23-131, una región dentro del dominio extracelular; este diseño probablemente dirige a epitopos accesibles en condiciones nativas y desnaturalizadas, por lo que admite aplicaciones de WB y IHC-P.
• Para WB, el peso molecular predicho es de ~17 kDa; sin embargo, la extensa O-glicosilación y sialilación puede hacer que las bandas aparezcan en 36–44 kDa o un peso mayor en condiciones reductoras. Valide el resultado utilizando controles positivos adecuados, como lisados de pulmón o placenta.
• Para IHC-P, considere la recuperación de antígeno y valide la tinción en tejidos positivos conocidos (por ejemplo, secciones de placenta, pulmón o tumor) con controles negativos adecuados.
• Se ha confirmado la reactividad cruzada con ratón y rata; sin embargo, verifique la homología de secuencia y los tamaños de banda esperados entre especies antes de usarla en experimentos multiespecie.
• Para ELISA, el inmunógeno recombinante puede servir como estándar de captura; pruebe las condiciones de recubrimiento y asegure la compatibilidad con el anticuerpo de detección.

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