Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-PPP1R15A (GADD34) para WB, IF/ICC, ELISA - O75807

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PPP1R15A

• Identidad de la proteína: También conocida como GADD34, proteína inducible por detención del crecimiento y daño en el ADN, y homólogo de MyD116. Codificada por el gen PPP1R15A (GeneID: 23645, SWISS: O75807). Peso molecular de UniProt ~73.5 kDa; observado ~73 kDa.
• Función principal: Recluta la proteína fosfatasa 1 (PP1) para desfosforilar el factor de iniciación de la traducción eIF-2A, invirtiendo el cierre de la síntesis proteica inducida por estrés y facilitando la recuperación celular del estrés. Referencias relacionadas: PMID:26095357 PMID:26742780
• Modulación de la vía TGF-β: Regula a la baja la señalización TGF-beta al promover la desfosforilación mediada por PP1 de TGFB1. Referencias relacionadas: PMID:14718519
• Apoptosis: Puede promover la apoptosis al inducir la fosforilación de p53 en Ser-15. Referencias relacionadas: PMID:14635196
• Autofagia: Esencial para una autofagia sostenida al ajustar la traducción durante la inanición, permitiendo así la biogénesis lisosomal y el flujo autofágico. Referencias relacionadas: PMID:32978159
• Factor de restricción viral: Atenua la replicación del VIH-1 al inhibir la traducción mediada por ARN de TAR. Referencias relacionadas: PMID:31778897
• Infección microbiana: Promueve la replicación del enterovirus 71 al mediar la actividad del sitio de entrada interno del ribosoma (IRES) del UTR 5' viral.
• Localización subcelular: Se asocia con la membrana del retículo endoplásmico y la membrana externa mitocondrial.
• Modificaciones postraduccionales: Sujeta a fosforilación y conjugación tipo ubiquitina (ubiquitinación).
• El splicing alternativo genera múltiples isoformas de transcripción.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 375-674 del PPP1R15A humano, cubriendo una región C-terminal. El anticuerpo policlonal resultante puede reconocer múltiples isoformas o formas modificadas.
• Para Western blot (WB), se espera una banda alrededor de 73 kDa; pueden aparecer bandas adicionales debido a modificaciones postraduccionales o splicing alternativo. El pretratamiento de las muestras con inhibidores de fosfatasas puede ayudar a preservar las señales dependientes de la fosforilación.
• En IF/ICC, considere que GADD34 se localiza en el RE y las mitocondrias; la tinción simultánea con marcadores de orgánulos puede ayudar en la verificación. La permeabilización con detergentes (p. ej., 0.1% Triton X-100) generalmente es necesaria.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con muestras de humano, ratón y rata. Valide en su sistema modelo específico e incluya controles positivos y negativos apropiados (p. ej., células inducidas por estrés vs. sin tratar).
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir la optimización del antígeno de recubrimiento y las condiciones de detección; el inmunógeno recombinante puede servir como control positivo.

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