Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-Prdm9 para IHC-P, ELISA y CUT&Tag - Q96EQ9

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de PRDM9

• PRDM9 (también conocido como Meisetz, Hst1 o proteína de esterilidad híbrida 1) es una histona metiltransferasa que metila de forma secuencial en estado mono-, di- y tri- tanto a H3K4 como a H3K36 para generar H3K4me3 y H3K36me3, cumpliendo un papel fundamental en la determinación de puntos calientes meióticos y la recombinación. Referencias relacionadas: PMID:16292313 PMID:24095733 PMID:24785241
• Además de H3, PRDM9 puede mono- y di-metilar la histona H4 en Lys20 (H4K20me1/me2) y tri-metilar H3K9, siendo H3K9me2 el sustrato preferido. Referencias relacionadas: PMID:24785241 PMID:27362481
• Durante la profase meiótica, PRDM9 se une a motivos específicos de ADN a través de su conjunto de dedos de zinc C-terminal, dirigiendo el enriquecimiento local de H3K4me3 y H3K36me3 en nucleosomas adyacentes. Referencias relacionadas: PMID:22028627 PMID:27362481 PMID:29478809
• Este paisaje de modificaciones de histonas promueve la formación de roturas de doble cadena de ADN (DSB) programadas en los puntos calientes unidos a PRDM9, iniciando la recombinación meiótica. Referencias relacionadas: PMID:16292313 PMID:29478809
• PRDM9 interactúa con múltiples complejos proteicos durante la meiosis: se asocia con CDYL y EHMT2 en el leptotema temprano, y más tarde recluta a EWSR1 y CXXC1, que conectan los puntos calientes con el eje cromosómico a través de REC8. Referencias relacionadas: PMID:27932493 PMID:25894966
• Más allá de su papel en la recombinación, PRDM9 funciona como activador transcripcional en la profase meiótica temprana, aprovechando H3K4me3 y H3K36me3 como marcas epigenéticas para la activación génica. Referencias relacionadas: PMID:16292313
• PRDM9 sufre autometilación, y su actividad metiltransferasa puede verse atenuada por acetilación o fosforilación de la histona H3. Referencias relacionadas: PMID:28126738 PMID:27362481
• PRDM9 se expresa específicamente en células germinales que entran en profase meiótica en las gónadas fetales femeninas y en el testículo postnatal, y se localiza en el núcleo y los cromosomas. Referencias relacionadas: PMID:16292313 PMID:27932493

Guía experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo se generó contra una proteína de fusión recombinante que abarca los aminoácidos 87–370 de PRDM9 de ratón, una región que incluye el dominio PR/SET y excluye el conjunto de dedos de zinc altamente repetitivo, lo que puede mejorar la especificidad por el objetivo.
• Ha sido reportado para su uso en aplicaciones de IHC-P, ELISA y CUT&Tag; considere optimizar la titulación del anticuerpo y las condiciones del ensayo para su sistema modelo específico.
• Dada la reactividad cruzada observada con PRDM9 humano, este anticuerpo se puede emplear en el análisis de muestras humanas; sin embargo, se recomienda una validación independiente en el tejido o tipo celular correspondiente.
• El peso molecular predicho de PRDM9 es de aproximadamente 97 kDa; para aplicaciones de transferencia Western que aún no están enumeradas, pruebe un panel de controles positivos como lisados de células germinales meióticas.
• Para IHC-P, los métodos de recuperación de antígeno y los sistemas de detección deben estandarizarse usando secciones de tejido que se sabe que expresan PRDM9, como testículo u ovario fetal.

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