Anticuerpo monoclonal anti-proteína priónica para WB, ELISA - P04156

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la proteína priónica

• La proteína priónica mayoritaria (PrP), también conocida como PrPc, CD230 y proteína priónica (PrP27-30, PrP33-35C), está codificada por el gen PRNP en humanos. Existe en múltiples isoformas debido a la iniciación alternativa.
• La PrP está anclada a la monocapa externa de la membrana celular mediante un anclaje de glucosilfosfatidilinositol (GPI) y también se localiza en el aparato de Golgi.
• La función fisiológica de la PrP no se comprende completamente, pero puede contribuir al desarrollo neuronal y a la plasticidad sináptica, y es necesaria para el mantenimiento de la vaina de mielina neuronal.
• La PrP puede promover la homeostasis de la mielina al actuar como agonista del receptor ADGRG6, y también puede desempeñar un papel en la captación y la homeostasis del hierro.
• Los oligómeros solubles de PrP pueden ser tóxicos para las células de neuroblastoma e inducir apoptosis in vitro, lo que sugiere un papel en la neurodegeneración en condiciones patológicas.
• La PrP experimenta modificaciones postraduccionales clave, incluida la glucosilación ligada a N, la formación de enlaces disulfuro y la unión de cobre/zinc, que son importantes para su estructura y función.
• La proteína está asociada con varias enfermedades neurodegenerativas conocidas como enfermedades priónicas o encefalopatías espongiformes transmisibles (por ejemplo, la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, el síndrome de Gerstmann-Sträussler-Scheinker, el insomnio familiar fatal y el kuru).

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado es un péptido sintético correspondiente a la región C-terminal (aminoácidos 154-253) de la PrP humana, que abarca parte del núcleo resistente a la proteinasa K (PrP27-30). Esta región está conservada entre especies, lo que respalda la reactividad cruzada observada con ratón y rata.
• En el análisis por Western blot (WB), se espera que el anticuerpo detecte una banda de aproximadamente 28 kDa correspondiente al monómero no glucosilado; sin embargo, debido a la glucosilación, pueden observarse bandas adicionales de mayor peso molecular (por ejemplo, 35-40 kDa). Para una interpretación precisa, considere la desglicosilación o compare con patrones de glucosilación conocidos.
• Para aplicaciones de ELISA, asegúrese de utilizar condiciones adecuadas de recubrimiento y bloqueo, y valide el rendimiento del anticuerpo con controles positivos y negativos pertinentes en su matriz de muestra específica.
• Dada la capacidad del anticuerpo para reconocer el dominio C-terminal conservado, puede detectar tanto la PrP celular normal (PrPc) como las isoformas scrapie asociadas a enfermedades (PrPSc). Para discriminar entre estas formas, puede ser necesario realizar un tratamiento con proteinasa K antes del WB o utilizar anticuerpos conformacionales específicos.

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