Anticuerpo monoclonal de conejo anti-PRP19 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9UMS4

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PRP19

• PRPF19 (Factor 19 de procesamiento de ARN pre-mensajero, también conocido como PRP19, SNEV, PSO4, NMP200, hPSO4) es una proteína de 55 kDa que actúa como una ligasa ubiquitina-proteína y componente central de múltiples complejos involucrados en el empalme de ARNm y la reparación del ADN.
• Es esencial para el empalme de ARN pre-mensajero como componente del espliceosoma (PubMed:28076346, PubMed:28502770, PubMed:29301961), y dentro del complejo PRP19C/NTC, cataliza la poliubiquitinación unida a 'Lys-63' de la proteína PRPF3 del snRNP U4 para estabilizar el tri-snRNP U4/U5/U6 (PubMed:20595234).
  Referencias relacionadas: PMID:28076346, PMID:28502770, PMID:29301961, PMID:20595234
• En la respuesta al daño del ADN, PRPF19 es reclutado a los sitios de daño por RPA y ubiquitina directamente a RPA1 y RPA2, permitiendo la activación de ATR-ATRIP (PubMed:24332808). También participa en la reparación de roturas de doble cadena del ADN mediante el reclutamiento de SETMAR (PubMed:18263876) y en la reparación de enlaces cruzados entre cadenas (PubMed:16223718).
  Referencias relacionadas: PMID:24332808, PMID:18263876, PMID:16223718
• PRPF19 se localiza principalmente en el núcleo y el nucleoplasma, pero también se encuentra en el huso mitótico, el citoplasma y las gotas lipídicas, lo que refleja sus múltiples funciones.
• Se expresa de forma ubicua en tejidos humanos, con una expresión notablemente más débil en células senescentes y niveles más altos en líneas celulares tumorales, lo que sugiere un papel en la proliferación celular y el cáncer.
• La proteína contiene repeticiones WD y un dominio U-box, clasificándola como una E3 ubiquitina transferasa tipo RING; sufre acetilación y es ella misma objeto de ubiquitinación.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 400-504 cerca del extremo C-terminal; verifique la conservación de este epítopo en PRPF19 de ratón y rata (UniProt Q9UMS4, Q8BND5, Q5XI47) para anticipar posibles diferencias específicas de especie en la reactividad.
• Para Western blot, el peso molecular esperado es de 55 kDa; tenga en cuenta que las modificaciones postraduccionales o las variantes de empalme pueden producir bandas adicionales; incluya marcadores de peso molecular y controles de carga apropiados.
• En inmunoprecipitación e IF/ICC, evalúe los patrones de tinción nuclear y citoplasmática; se recomienda una fijación y permeabilización suaves para preservar el reconocimiento del epítopo.
• Para ELISA, el anticuerpo puede usarse como reactivo de captura o detección; emparejarlo con un anticuerpo monoclonal dirigido contra un epítopo no superpuesto puede mejorar la especificidad del ensayo.
• Al ser un anticuerpo monoclonal de conejo, se espera que este anticuerpo tenga alta afinidad y baja variabilidad entre lotes; aún así, valide cada nuevo lote en su sistema de ensayo específico.

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