Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-PSA/KLK3 para WB, ELISA - P07288

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PSA/KLK3

• El antígeno específico de próstata (PSA), también denominado gamma-seminoproteína, calicreína-3 (KLK3), antígeno P-30 o semenogelasa, es un miembro de la familia de las serina proteasas de calicreína tisular codificada por el gen KLK3 (GeneID 354).
• La proteína se sintetiza como una preproenzima, se procesa en un zimógeno y finalmente se activa mediante escisión para producir la glicoproteína madura de ~29 kDa (UniProt: P07288).
• El PSA se expresa predominantemente en las células epiteliales de la próstata y se secreta al plasma seminal y al suero; su naturaleza secretada se confirma mediante la palabra clave "Secreted" y la anotación de localización subcelular.
• Su función fisiológica principal es la hidrólisis de la semenogelina-1, la principal proteína formadora de gel en el semen, lo que resulta en la licuefacción del coágulo seminal y la facilitación de la motilidad de los espermatozoides.
• El PSA pertenece a la familia extendida de calicreínas agrupadas en el cromosoma 19; el empalme alternativo del gen KLK3 genera múltiples isoformas.
• La proteína se modifica extensamente después de la traducción, incluyendo la formación de enlaces disulfuro, la glicosilación y el procesamiento proteolítico a partir del zimógeno; contiene un péptido señal para la secreción.
• Los estudios estructurales (palabra clave 3D-structure) han dilucidado el tríada catalítica y el bolsillo de unión al sustrato típicos de las serina proteasas tipo tripsina.
• El PSA ha sido identificado directamente mediante secuenciación de proteínas y proteómica, sirviendo como proteína de referencia para el proteoma humano (palabras clave: secuenciación directa de proteínas, identificación por proteómica, proteoma de referencia).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a una secuencia dentro de la proteína PSA madura (aminoácidos 162-261), evitando las regiones del péptido señal y el propéptido. Esta región es probable que genere anticuerpos que reconozcan tanto el PSA libre como el PSA complejado con inhibidores.
• Para el análisis de Western blot (WB), se recomienda un protocolo de SDS-PAGE reductor; espere una banda correspondiente a la proteína madura a aproximadamente 29 kDa. Las líneas celulares derivadas de la próstata (p. ej., LNCaP) o el plasma seminal humano pueden servir como controles positivos.
• Al desarrollar ensayos ELISA, el emparejamiento de este anticuerpo monoclonal con un anticuerpo de detección contra un epítopo que no se superponga puede mejorar la sensibilidad. Valide el rendimiento con estándares de PSA recombinante y muestras clínicas para confirmar la especificidad.
• Tenga en cuenta que este anticuerpo está validado para PSA humano; no se ha informado reactividad cruzada con otras calicreínas.

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