Anti-PSAP (Prosaposina) Anticuerpo Policlonal de Conejo para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P07602

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PSAP (Prosaposina)

• La prosaposina (PSAP) es una glicoproteína precursora de 524 aminoácidos que se procesa proteolíticamente en los lisosomas para generar cuatro péptidos de saposina homólogos (saposina A, B, C y D), que sirven como proteínas activadoras no enzimáticas esenciales para las hidrolasas de esfingolípidos.
• Las saposinas facilitan la degradación de glicoesfingolípidos extrayendo sustratos lipídicos de bicapas de membrana y presentándolos a sus enzimas cognadas; la saposina B activa la arilsulfatasa A, la beta-galactosidasa y la alfa-galactosidasa A, mientras que la saposina C activa la glucocerebrosidasa y la saposina D activa la ceramidasa ácida.
• Más allá de su papel como cofactor lisosomal, la prosaposina de longitud completa exhibe funciones neurotróficas y mieliotróficas al señalizar a través de los receptores acoplados a proteínas G GPR37 y GPR37L1, promoviendo la supervivencia neuronal y la mielinización.
• PSAP se expresa ampliamente, con niveles altos en el cerebro, riñón e hígado, y se localiza principalmente en la luz del lisosoma; también se secreta y se detecta en fluidos extracelulares, incluido el líquido cefalorraquídeo y la leche.
• Las mutaciones en PSAP se asocian con diversas enfermedades de almacenamiento lisosomal, incluidas la enfermedad de Gaucher, la leucodistrofia metacromática y la enfermedad de Krabbe, así como formas complejas con deficiencias combinadas de saposinas; los polimorfismos también se han vinculado al riesgo de enfermedad de Parkinson.
• La proteína contiene múltiples enlaces disulfuro intracadena y sitios de glicosilación N que son críticos para su estabilidad, procesamiento y activación funcional. El precursor canónico de prosaposina tiene una masa molecular calculada de 58,1 kDa; la glicosilación extensa a menudo resulta en bandas de 65–70 kDa en SDS-PAGE.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los residuos 275–524 de PSAP humana, cubriendo los dominios de saposina C y D y el enlazador C-terminal; se espera que el anticuerpo policlonal resultante detecte tanto el precursor de longitud completa como posiblemente fragmentos procesados de saposina C/D.
• Para Western blot, se recomienda SDS-PAGE estándar en condiciones reductoras; comúnmente se observa una banda predominante a ~58 kDa en lisados de tejidos humanos, de ratón y rata, que representa el precursor de prosaposina. Pueden aparecer bandas inferiores adicionales debido al procesamiento proteolítico.
• Al realizar inmunofluorescencia, se requiere permeabilización para acceder a la localización lisosomal; se aconseja la tinción conjunta con un marcador lisosomal (p. ej., LAMP1) para estudios de colocalización.
• Para inmunohistoquímica en secciones embebidas en parafina, la recuperación de antígeno con tampón de citrato (pH 6,0) a menudo mejora la señal; los tejidos de control positivo incluyen cerebro (cerebelo, hipocampo) y riñón.
• Este anticuerpo puede usarse en ELISA como reactivo de captura o detección cuando se empareja con un anticuerpo monoclonal anti-PSAP adecuado; las diluciones óptimas y las condiciones del ensayo deben determinarse empíricamente.

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