Anticuerpo policlonal de conejo anti-PSMA4 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P25789

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PSMA4

• PSMA4 codifica la subunidad alfa tipo-4 del proteasoma, un componente central del proteasoma 20S, también designada como subunidad C9, subunidad L del proteasoma o alfa-3.
• Como parte de la partícula central 20S, PSMA4 contribuye a la estructura en forma de barril que degrada proteolíticamente la mayoría de las proteínas intracelulares de manera dependiente de ATP/ubiquitina a través del proteasoma 26S (20S + partículas reguladoras 19S) y también media la degradación independiente de ubiquitina mediante la asociación con reguladores PA200 o PA28.
• Las vías de degradación independientes de ubiquitina que involucran a PSMA4 son críticas para la espermatogénesis (complejo 20S-PA200) y la generación de péptidos antigénicos presentados por MHC clase I (complejo 20S-PA28), destacando su papel tanto en la biología reproductiva como en la inmunidad adaptativa.
• PSMA4 se localiza predominantemente en el citoplasma y el núcleo, consistente con la amplia distribución intracelular del sistema proteasoma para el control de calidad de proteínas y la proteólisis regulada.
• La proteína sufre modificaciones postraduccionales que incluyen acetilación y fosforilación, que pueden modular la actividad o el ensamblaje del proteasoma, y está sujeta a empalme alternativo, generando potencialmente isoformas con funciones distintas.
• La presencia de una palabra clave de interacción huésped-virus sugiere que PSMA4 y el proteasoma pueden ser explotados por patógenos virales, un área de investigación activa en biología de la infección.
• Las subunidades alfa del proteasoma, incluida PSMA4, forman los anillos externos del núcleo 20S y controlan la entrada del sustrato, con funciones específicas en el reconocimiento y despliegue de sustratos antes de su degradación.

Guía experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo se generó contra la proteína recombinante de PSMA4 humano de longitud completa, que comparte una alta homología de secuencia con los ortólogos de ratón y rata; por lo tanto, se espera que reconozca PSMA4 de estas especies, pero se recomienda verificar en el tipo de muestra específico.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es de ~29 kDa; sin embargo, debido a posibles modificaciones postraduccionales, la migración real de la banda puede variar; asegure el porcentaje de gel y las condiciones de transferencia apropiados.
• En inmunoprecipitación, la naturaleza policlonal puede capturar el PSMA4 nativo y potencialmente los complejos del proteasoma asociados; considere protocolos de reticulación si desea preservar las interacciones proteicas.
• Para inmunofluorescencia/ICC, PSMA4 se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo; los métodos de permeabilización y fijación pueden afectar los patrones de tinción; incluya controles apropiados.
• Las aplicaciones de ELISA pueden beneficiarse del uso de un par de anticuerpos coincidentes para ensayos tipo sándwich; valide con curvas estándar de PSMA4 recombinante.
• Dado que PSMA4 es una proteína de mantenimiento abundante, los controles de carga como beta-actina o GAPDH pueden no reflejar una normalización precisa; considere la tinción de proteína total o controles específicos del proteasoma.

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