Anticuerpo policlonal anti-PSMA/FOLH1 para WB y ELISA - Q04609

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de PSMA/FOLH1

• PSMA/FOLH1 (glutamato carboxipeptidasa 2) es una metaloenzima multifuncional dependiente de zinc codificada por el gen FOLH1, también conocida como GCPII, NAALADase I o folato hidrolasa 1. Existen múltiples isoformas; PSMA' predomina en la próstata normal y PSMA-1/PSMA-9 se asocian con los tumores prostáticos.
• Posee dos actividades enzimáticas: folato hidrolasa (escisión del folilpoliglutamato-γ) y NAALADasa (hidrólisis del N-acetilaspartilglutamato, NAAG). En el intestino, facilita la absorción del folato dietético; en el cerebro, regula la neurotransmisión glutamatérgica al degradar NAAG y liberar glutamato.
• Desempeña un papel bien documentado en la progresión de los tumores prostáticos; presenta una expresión elevada constante en el epitelio prostático y está significativamente sobrerregulada en los cánceres de próstata primarios y metastásicos.
• Su localización subcelular se encuentra principalmente en la membrana celular como glucoproteína transmembrana de tipo II con una cola citoplasmática, aunque también puede detectarse en el citoplasma.
• La distribución tisular es amplia: presenta una expresión elevada en la próstata, el cerebro (estriado ventral y tronco encefálico), el riñón, el hígado y el intestino delgado (borde en cepillo yeyunal). Se observan niveles inferiores en la vejiga urinaria, los testículos, los ovarios y otros órganos. La expresión de las isoformas varía entre los tejidos normales y malignos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la N-glucosilación y la fosforilación; la enzima requiere dos iones de zinc y calcio para la actividad catalítica y la estabilidad estructural.
• In vitro, presenta una actividad adicional de tipo dipeptidil-peptidasa IV, escindiendo sustratos como Gly-Pro-AMC, lo que indica versatilidad en la hidrólisis de enlaces peptídicos.
• UniProt la clasifica como una enzima multifuncional, metaloproteasa y carboxipeptidasa; está sujeta a corte y empalme alternativo, lo que da lugar a isoformas funcionalmente distintas.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético ubicado dentro de los aminoácidos 50–150 del dominio extracelular de PSMA/FOLH1 humano. Esta región está conservada entre humano, ratón y rata, lo que respalda la reactividad cruzada observada.
• Para Western blot, se espera una banda cercana a 84 kDa en líneas celulares de cáncer de próstata humano (por ejemplo, LNCaP y PC‑3) o en homogeneizados de tejido prostático. Verifique la especificidad mediante controles adecuados y considere la recuperación antigénica si utiliza cortes incluidos en parafina en IHC (no validado en este caso).
• En aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede utilizarse como reactivo de captura o de detección. La combinación con un anticuerpo monoclonal dirigido contra un epítopo no solapado podría mejorar la sensibilidad en ensayos tipo sándwich. La reactividad cruzada con muestras de roedores debe evaluarse empíricamente.
• Dado que los anticuerpos policlonales reconocen múltiples epítopos, la consistencia entre lotes debe supervisarse en los ensayos cuantitativos. Se recomiendan experimentos piloto con un estándar de referencia antes de realizar estudios a gran escala.

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