Anticuerpo policlonal de conejo anti-PSMD14 para WB, IF/ICC, ELISA - O00487

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PSMD14

• PSMD14, también conocida como POH1 o RPN11, es un componente de la subunidad reguladora del proteasoma 26S, un gran complejo multiproteico responsable de la degradación dependiente de ATP de las proteínas ubiquitinadas, fundamental para la homeostasis proteica, la progresión del ciclo celular, la apoptosis y la reparación del ADN. Referencias relacionadas: PMID:9374539 PMID:1317798

• Funciona como una metaloproteasa que escinde específicamente las cadenas de poliubiquitina unidas por Lys-63 dentro del proteasoma 26S, una actividad deubiquitante crítica requerida para el procesamiento de sustratos y el reciclaje de ubiquitina. Referencias relacionadas: PMID:22909820

• En la reparación de daños en el ADN, PSMD14 promueve la unión de extremos no homólogos (NHEJ) al eliminar las poliubiquitinas unidas por Lys-63, facilitando la retención de JMJD2A/KDM4A en la cromatina y limitando la acumulación de TP53BP1; también mejora la recombinación homóloga al favorecer la carga de RAD51. Referencias relacionadas: PMID:22909820

• Además, PSMD14 regula la macroautofagia al garantizar el transporte retrógrado de Golgi a ER mediante su actividad deubiquitante, evitando la localización incorrecta de proteínas de autofagia esenciales y permitiendo la formación correcta del autofagosoma. Referencias relacionadas: PMID:32210007

• La proteína se expresa de forma generalizada, con niveles más altos en el corazón y el músculo esquelético, lo que refleja su función fundamental de mantenimiento celular.

• Sus características estructurales y funcionales clave incluyen su dominio de metaloproteasa con unión a zinc y su clasificación como tiol proteasa; también es una fosfoproteína y forma parte de la vía de conjugación de ubiquitina.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado corresponde a los aminoácidos 160-300 de la PSMD14 humana, una región que se predice expuesta y conservada entre especies, lo que puede contribuir a la reactividad cruzada del anticuerpo con ratón y rata.
• Para Western blot (WB), la banda esperada se encuentra en ~35 kDa; se recomienda utilizar controles de carga adecuados y validar la señal con lisados de siRNA o knockout para confirmar la especificidad.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), incluya controles negativos (por ejemplo, solo anticuerpo secundario) y verifique la localización con marcadores de organelos, ya que PSMD14 se asocia con el proteasoma tanto en compartimentos citoplasmáticos como nucleares.
• Para ELISA, realice experimentos de titulación para determinar las concentraciones óptimas de anticuerpo y de antígeno de recubrimiento; el rendimiento del anticuerpo debe validarse en la matriz de muestra correspondiente.

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