Anticuerpo Monoclonal Anti-PTEN para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P60484

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PTEN

• PTEN (homólogo de fosfatasa y tensina) es una proteína fosfatasa de doble especificidad y fosfatasa de lípidos, que actúa como un supresor tumoral crítico. El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 1-403 de la isoforma canónica (UniProt P60484).
• Como fosfatasa de lípidos, PTEN desfosforila el fosfatidilinositol 3,4,5-trisfosfato (PtdIns(3,4,5)P3) para antagonizar la vía de señalización PI3K-AKT/PKB, modulando así la progresión del ciclo celular, la supervivencia y el metabolismo. Referencias relacionadas: PMID:31492966 PMID:37279284
• También funciona como una fosfatasa de proteínas, desfosforilando proteínas fosforiladas en tirosina, serina y treonina, impactando diversas cascadas de señalización. Referencias relacionadas: PMID:9187108 PMID:9256433 PMID:9616126
• PTEN se localiza en múltiples compartimentos subcelulares, incluyendo el citoplasma, el núcleo, los cuerpos PML, las espinas dendríticas, la densidad postsináptica y puede ser secretado, reflejando sus roles multifacéticos.
• Se expresa a niveles relativamente altos en todos los tejidos adultos, incluyendo el corazón, el cerebro, la placenta, el pulmón, el hígado, el músculo, el riñón y el páncreas.
• PTEN desempeña un papel clave en la migración celular al desfosforilar la quinasa de adhesión focal e interactuar con complejos DLC1/TNS3 para regular la activación de RHOA y RAC1 en el borde anterior y la parte posterior de las células migratorias. Referencias relacionadas: PMID:22279049 PMID:26166433
• Las modificaciones post-traduccionales, como la monoubiquitinación, influyen en la localización subcelular y la función apoptótica de PTEN; el PTEN monoubiquitinado nuclear exhibe un mayor potencial apoptótico. Referencias relacionadas: PMID:10468583 PMID:18716620

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca casi la longitud completa del PTEN humano (aa 1-403), por lo que se espera que el anticuerpo reconozca el PTEN total independientemente de su estado de fosforilación. Para Western blot, considere incluir inhibidores de fosfatasas en su tampón de lisis para preservar los patrones de fosforilación del PTEN endógeno.
• PTEN migra aproximadamente a 47 kDa en SDS-PAGE; utilice marcadores de peso molecular apropiados y ejecute controles positivos/negativos adecuados (por ejemplo, lisados de células con PTEN knockout) para confirmar la identidad de la banda.
• Para inmunoprecipitación, pruebe diferentes relaciones anticuerpo-lisado y condiciones de incubación para optimizar la eficiencia de captura. Se ha demostrado el rendimiento del anticuerpo en IP; sin embargo, los sistemas experimentales individuales pueden requerir optimización.
• En inmunofluorescencia/ICC, PTEN exhibe tinción tanto citoplasmática como nuclear. Los métodos de fijación y permeabilización pueden afectar significativamente los patrones de localización; valide la tinción en su línea celular con perfiles de expresión de PTEN conocidos y use controles de isotipo.

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