Anticuerpo policlonal anti-PUS10 para WB y ELISA - Q3MIT2

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de PUS10

• PUS10 (también conocida como DOBI, Hup10, CCDC139) es una proteína multifuncional que actúa como sintetasa de pseudouridilato de tRNA en el citoplasma y participa en el procesamiento de pri-miRNA en el núcleo, con funciones diferenciadas según su localización subcelular. Referencias relacionadas: PMID:31819270 PMID:33023933
• En el citoplasma, PUS10 cataliza la conversión de uracilo en pseudouridina en las posiciones 54 y 55 del bucle Ψ GC de un subconjunto de tRNA, una modificación esencial para la estructura y función del tRNA. Referencias relacionadas: PMID:30530625 PMID:31819270 PMID:33023933
• La actividad de pseudouridilación de PUS10 aumenta en presencia de 1-metiladenosina en las posiciones 53–61 del tRNA diana, lo que indica un mecanismo regulador dependiente del contexto. Referencias relacionadas: PMID:30530625
• En el núcleo, PUS10 se une a los microRNA primarios (pri-miRNA) y promueve su procesamiento independientemente de su actividad de sintetasa de pseudouridilato, lo que pone de relieve una función no catalítica en la biogénesis de miRNA. Referencias relacionadas: PMID:31819270
• PUS10 modula la apoptosis inducida por TRAIL/TNFSF10 mediante la activación de la procaspasa-8 y la promoción de la escisión de BID, y es necesaria para la progresión a través de la vía intrínseca mitocondrial de muerte celular. Referencias relacionadas: PMID:14527409 PMID:19712588
• A nivel subcelular, PUS10 se localiza en el núcleo, el citoplasma y las mitocondrias, en consonancia con sus múltiples funciones en el procesamiento de RNA y la señalización de la muerte celular.
• La proteína contiene dominios de hélice superenrollada y está anotada con palabras clave que incluyen actividad isomerasa, unión a metales, zinc, fosfoproteína y procesamiento de tRNA, lo que refleja sus características estructurales y enzimáticas.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado para este anticuerpo (una proteína de fusión recombinante que abarca los aminoácidos 290–529) cubre la región C-terminal de PUS10, lo que puede resultar útil para detectar tanto las formas de longitud completa como las truncadas. Considere verificar la detección de su isoforma diana en el sistema de muestra correspondiente.
• Para Western blot, el peso molecular previsto es de aproximadamente 60 kDa, pero las modificaciones postraduccionales o el procesamiento subcelular pueden provocar ligeros desplazamientos de las bandas. Se recomienda validar el anticuerpo en el lisado de células o tejidos específico.
• Las aplicaciones de ELISA pueden optimizarse utilizando el anticuerpo con PUS10 recombinante o fragmentos peptídicos. La reactividad cruzada con ratón y rata sugiere su utilidad en estudios comparativos; no obstante, se recomienda realizar una titulación experimental e incluir controles.
• Dado que las funciones de PUS10 difieren entre el núcleo y el citoplasma, los ensayos de fraccionamiento o la inmunofluorescencia pueden ser informativos al explorar la localización subcelular; tenga en cuenta que este anticuerpo no ha sido validado para IF o IHC y requeriría pruebas independientes.

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