Anticuerpo Policlonal Anti-PYCRL para WB y ELISA - Q53H96

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PYCRL

• PYCRL (Pirrolina-5-carboxilato reductasa 3), también conocida como PYCR3, es una enzima que cataliza el paso final en la biosíntesis de prolina, responsable de convertir la pirrolina-5-carboxilato (P5C) en L-prolina utilizando NAD(P)H como cofactor. Esta reacción está específicamente vinculada a la vía de prolina derivada de la ornitina. Referencias relacionadas: PMID:23024808 PMID:36414121
• La proteína se localiza predominantemente en el citoplasma, donde actúa sobre el P5C citoplasmático generado a partir del catabolismo de la ornitina.
• PYCRL es miembro de la familia de reductasas de pirrolina-5-carboxilato, junto con PYCR1 y PYCR2; sin embargo, PYCRL se dedica de manera única a la ruta de ornitina a prolina, mientras que las otras isoformas funcionan principalmente en la síntesis de prolina derivada del glutamato.
• El splicing alternativo del gen PYCR3 produce múltiples variantes de transcripción, que pueden dar lugar a isoformas proteicas con funciones alteradas o propiedades regulatorias.
• Se han reportado modificaciones postraduccionales como la acetilación, que potencialmente modulan la actividad enzimática o la estabilidad.
• El peso molecular calculado de la proteína PYCRL es de aproximadamente 28,7 kDa, consistente con la banda observada a 29 kDa en experimentos de western blot.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para ensayos de western blot (WB), prepare lisados celulares totales de líneas celulares humanas o de ratón que se sepa que expresan PYCRL; se espera una banda única cerca de 29 kDa. Debido a la naturaleza policlonal, pueden aparecer múltiples bandas si hay epítopes reactivos cruzados; considere usar bloqueo con péptidos para confirmar la especificidad.
• En aplicaciones de ELISA, este anticuerpo puede emplearse para ELISA directo o sándwich para cuantificar PYCRL en muestras biológicas; titre el anticuerpo para lograr una relación señal/ruido óptima.
• Se ha demostrado reactividad cruzada con el PYCRL de ratón; para otras especies, el análisis de homología de secuencia puede guiar la reactividad potencial, pero la validación empírica es esencial.
• Dado que el inmunógeno abarca los residuos 13–286, el anticuerpo probablemente reconoce múltiples epítopes lineales y conformacionales; las condiciones desnaturalizantes y reductoras en WB son generalmente compatibles.
• Al estudiar el metabolismo de la prolina, combine este anticuerpo con inhibidores de la ornitina aminotransferasa para modular los niveles de sustrato de PYCRL y evaluar el flujo de la vía.
• Siempre incluya controles apropiados como líneas celulares con knockout de PYCRL o muestras tratadas con siRNA para confirmar la identidad de la banda.

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