Anticuerpo monoclonal de conejo anti-piruvato carboxilasa (PC) para WB y ELISA - P11498

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la piruvato carboxilasa

• La piruvato carboxilasa (PC) es una enzima mitocondrial que cataliza la carboxilación del piruvato dependiente de ATP para formar oxaloacetato, desempeñando un papel clave en la gluconeogénesis y la biosíntesis de lípidos.
• La enzima lleva a cabo una reacción en dos pasos: primero, la carboxilación de la biotina mediante la hidrólisis de ATP; segundo, la transferencia del grupo carboxilo al piruvato.
• Expresión específica de los tejidos: en el hígado y los riñones, la PC inicia la síntesis de glucosa; en el tejido adiposo, el hígado y el cerebro, contribuye a la síntesis de lípidos.
• Codificada por el gen PC, la proteína humana es una carboxilasa dependiente de biotina y miembro de la familia de enzimas multifuncionales.
• Localizada en la matriz mitocondrial, la PC contiene un péptido de tránsito para su importación a la mitocondria.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la acetilación y la fosforilación, y la proteína está asociada con variantes relacionadas con enfermedades.
• Contiene sitios de unión para ATP, biotina y manganeso, esenciales para su actividad catalítica.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aa 1-100) de la PC humana; esta región está conservada en el ratón y la rata, lo que coincide con la reactividad cruzada observada.
• En el Western blot, se espera una banda de aproximadamente 130 kDa; considere utilizar un gel reductor y controles de carga adecuados debido al elevado peso molecular.
• En ELISA, el anticuerpo puede utilizarse en formatos directo o de captura-detección; valídelo con PC recombinante o lisados tisulares en los que la PC se exprese en niveles elevados (por ejemplo, muestras de hígado o riñón).
• Dado que la PC es una proteína mitocondrial, la preparación de las muestras puede requerir protocolos de enriquecimiento mitocondrial para lograr una detección óptima.
• Debido a la presencia de biotina en la diana, evite los reactivos de bloqueo que contengan biotina si utiliza sistemas de detección basados en biotina, para reducir el fondo.

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