Anticuerpo Policlonal Anti-QPCT para WB, IF/ICC, ELISA - Q16769

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de QPCT

• Identidad de la proteína: QPCT (glutaminil-péptido ciclotransferasa), también conocida como glutaminil ciclasa (QC, sQC) y glutamil ciclasa, es una enzima transferasa secretada codificada por el gen QPCT. Pertenece a la familia de las aciltransferasas y contiene un sitio activo de unión a zinc.
• Función enzimática principal: Cataliza la formación de residuos N-terminales de piroglutamilo a partir de precursores glutaminilo o glutamilo, una modificación crítica para la bioactividad y estabilidad de muchos péptidos y proteínas.
• Especificidad del sustrato: Muestra un sesgo contra los residuos ácidos y de triptófano adyacentes inmediatamente al glutaminilo N-terminal, pero muestra poca dependencia de la longitud de la cadena peptídica más allá del segundo residuo.
• Procesamiento de amiloide-beta: In vitro, convierte péptidos de amiloide-beta truncados en el extremo N-terminal (p. ej., [Glu-3]-amiloide-beta) en formas modificadas con piroglutamato, que son más propensas a la agregación y neurotóxicas.
• Relevancia en enfermedades: Implicada en la enfermedad de Alzheimer a través de la generación de péptidos de piroglutamato-amiloide-beta encontrados en placas seniles; también puede participar en otras patologías relacionadas con el amiloide.
• Localización subcelular: Se secreta al espacio extracelular, consistente con su papel en la modificación de sustratos extracelulares como hormonas, quimiocinas y péptidos amiloides.
• Características estructurales: Contiene enlaces disulfuro, sitios de glicosilación N-ligada y un péptido señal; la proteína madura tiene un peso molecular predicho de aproximadamente 40.9 kDa (observado alrededor de 41 kDa).
• Empalme alternativo: El gen QPCT sufre empalme alternativo, produciendo múltiples isoformas; el inmunógeno (de longitud completa, aa 1-361) se dirige a todas las isoformas conocidas que contienen esta región.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la proteína QPCT humana de longitud completa (aa 1-361), lo que debería proporcionar una amplia cobertura de epítopos y puede reconocer tanto las formas precursoras como las maduras. La naturaleza policlonal puede mejorar la sensibilidad de detección entre variantes de empalme.
• Para Western blot, se espera una banda específica cerca de 41 kDa en condiciones reductoras. Debido a que QPCT se secreta, puede ser preferible analizar suero, plasma o sobrenadantes de cultivo celular en lugar de lisados celulares completos, dependiendo del contexto experimental.
• Para IF/ICC, los protocolos de fijación y permeabilización deben optimizarse para visualizar QPCT en los compartimentos de la vía secretora; la tinción extracelular puede requerir condiciones de no permeabilización. Se puede evaluar la co-localización con marcadores del Golgi o vesículas.
• Para ELISA, considere usar el anticuerpo en un formato sándwich con un anticuerpo de captura distinto; este anticuerpo puede servir como reactivo de detección. QPCT está presente en forma soluble en fluidos biológicos, lo que lo hace adecuado para ensayos cuantitativos.
• La reactividad cruzada con QPCT de ratón y rata permite la evaluación en modelos de roedores de neurodegeneración. Sin embargo, la identidad de la secuencia de aminoácidos no es del 100%, por lo que la sensibilidad debe validarse en la especie y el sistema de tejido relevantes.

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