Anticuerpo Policlonal Anti-RAB11B para WB, IF/ICC, ELISA - Q15907

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RAB11B

• La proteína Ras-relacionada Rab-11B (RAB11B), también conocida como proteína de unión a GTP YPT3, es un miembro de la superfamilia Ras de pequeñas GTPasas. Cicla entre estados inactivos unidos a GDP y activos unidos a GTP, funcionando como un interruptor molecular en el tráfico de membranas intracelulares.
  Referencias relacionadas: PMID:14627637, PMID:19029296, PMID:19244346

• RAB11B es un regulador clave del reciclaje endocítico, controlando el reciclaje apical de proteínas transmembrana como CFTR, ENaC, canales de potasio y canales de calcio tipo L dependientes de voltaje. También gobierna las vías secretoras constitutivas y reguladas, incluida la exocitosis de gránulos de insulina.
  Referencias relacionadas: PMID:14627637, PMID:19029296, PMID:19244346

• La proteína es esencial para el transporte y liberación de melanosomas desde los melanocitos, y modula el transporte intracelular de V-ATPasa en respuesta a la acidosis extracelular.
  Referencias relacionadas: PMID:14627637, PMID:19029296, PMID:19244346

• RAB11B promueve la ciliogénesis formando un complejo de direccionamiento ciliar con Rabin8/RAB3IP, ASAP1, RAB11FIP3 y ARF4, facilitando el tráfico vesicular preciliar al centríolo madre. Por el contrario, la fosforilación de WDR44 mediada por la señalización de LPAR1 interrumpe este complejo, inhibiendo el crecimiento de los cilios.
  Referencias relacionadas: PMID:25673879, PMID:31204173

• Además, RAB11B interactúa con RABL3 para impulsar la formación de vesículas ciliares, destacando sus roles multifacéticos en el ensamblaje del cilio primario.
  Referencias relacionadas: PMID:36052645

• A nivel subcelular, RAB11B se asocia predominantemente con las membranas de los endosomas de reciclaje, pero también se encuentra en vesículas citoplasmáticas, vesículas secretoras, membranas de vesículas sinápticas y membranas de fagosomas, lo que refleja sus funciones dinámicas de tráfico.

• Las modificaciones postraduccionales, incluida la acetilación, citrulinación, metilación y prenilación, regulan su actividad, localización e interacciones proteicas. El empalme alternativo genera múltiples isoformas, y las mutaciones se han relacionado con discapacidad intelectual.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 100–200 de la proteína humana RAB11B, que se encuentra dentro de una región probablemente conservada entre especies, consistente con la reactividad cruzada reportada a ratón y rata. Este diseño basado en péptido puede reconocer tanto conformaciones proteicas desnaturalizadas como nativas.
• Para Western blotting, se espera una banda de aproximadamente 24 kDa. Dado que RAB11B sufre prenilación y otras modificaciones, se pueden observar ligeros cambios de tamaño o bandas adicionales en algunas muestras; valide con controles positivos como lisados celulares de HeLa o HEK293.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, generalmente se requiere permeabilización para dianas intracelulares. Deben esperarse patrones de tinción endosomal y vesicular, con posible enriquecimiento en endosomas de reciclaje.
• Para aplicaciones de ELISA, el inmunógeno peptídico puede servir como antígeno de recubrimiento, pero se recomienda una optimización cuidadosa de la dilución del anticuerpo y las condiciones de bloqueo.
• Como con cualquier anticuerpo policlonal, la consistencia entre lotes debe verificarse utilizando un control positivo estandarizado. Considere validar en el sistema de muestra relevante (humano, ratón o rata) para confirmar el rendimiento.

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