Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Rab12 [validado por KO] para WB y ELISA - Q6IQ22

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de Rab12

• RAB12 es un miembro de la superfamilia Ras de pequeñas GTPasas, que actúa como interruptor molecular que cicla entre las conformaciones inactiva unida a GDP y activa unida a GTP para regular el tráfico de membranas intracelulares.
• Desempeña un papel en el transporte de proteínas desde endosomas de reciclaje hasta lisosomas, facilitando la degradación de cargas como el receptor de transferrina.
• RAB12 participa en la autofagia, localizándose en las membranas autofagosomales e influyendo en los procesos autofágicos.
• A nivel subcelular, RAB12 se encuentra en las membranas de los endosomas de reciclaje, lisosomas, el aparato de Golgi y las vesículas autofágicas.
• La proteína sufre modificaciones postraduccionales clave que incluyen la prenilación para el anclaje a la membrana, así como fosforilación y acetilación.
• Como GTPasa, RAB12 se une a nucleótidos de guanina e iones de magnesio, que son esenciales para su actividad enzimática.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno cubre la longitud completa de la proteína Rab12 humana (aa 1-244), lo que sugiere que el anticuerpo puede reconocer Rab12 nativa en aplicaciones de Western blot y ELISA; valide usando controles positivos y negativos apropiados en su sistema de muestra específico.
• Para Western blot, considere usar lisados de líneas celulares humanas y de ratón (por ejemplo, HeLa, NIH/3T3) y un control de knockout para confirmar la especificidad, dada la designación [validado por KO].
• En ELISA, titule el anticuerpo contra la proteína recombinante Rab12 para determinar las concentraciones de trabajo óptimas e incluya una curva de calibración para el análisis semicuantitativo.
• Debido a la bivalencia del anticuerpo, el rendimiento de ELISA directo puede requerir una pre-recubrimiento con antígeno recombinante; considere probar formatos indirectos para obtener una mejor sensibilidad.
• Rab12 tiene un peso molecular predicho de 27 kDa; confirme la migración de la banda en el peso esperado en condiciones reductoras y tenga en cuenta las posibles modificaciones postraduccionales que pueden causar desplazamientos menores.

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